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500
- 供应商:
镜像绮点
- 肿瘤类型:
-
- 细胞类型:
原代细胞
- ATCC Number:
-
- 品系:
原代细胞
- 组织来源:
脐带组织
- 相关疾病:
-
- 物种来源:
狗
- 免疫类型:
否
- 细胞形态:
上皮样细胞
- 是否是肿瘤细胞:
-
- 器官来源:
脐带组织
- 运输方式:
冻存/复苏
- 年限:
长期
- 生长状态:
贴壁培养
- 规格:
T25
细胞详述
脐带是哺乳类的连接胎儿和胎盘的管状结构。脐带中通过尿膜的血管即脐动脉和脐静脉,卵黄囊的血管即脐肠系膜动脉及脐肠系膜静脉。在子宫中,子宫动脉在胎盘的母体部分出的毛细血管,与胎盘的子体部胎儿毛细血管靠近,在此处母体和胎儿的血液间进行CO2和O2,代谢产物即代谢废物和营养物质的交换。脐动脉将胎儿来的废物运送至胎盘,脐静脉将O2和营养物质从胎盘运送给胎儿。
由于脐带是分娩过程中的废弃物,同时从脐带中分离人脐静脉内皮细胞方法相对成熟,使得人脐静脉内皮细胞作为工具细胞,在医学和生物学研究领域中获得广泛应用。
细胞特性
1) 细胞来源于实验动物脐带组织。
2) 细胞鉴定:血小板-内皮细胞粘附分子(PECAM-1/CD31)或血管假性血友病因子(vWF)免疫荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:上皮样细胞,贴壁培养。
业务范围



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文献和实验的透光性。2 、免疫组织化学鉴定 :利用 Ⅷ因子相关抗原检测(或利用CD31和CD33免疫荧光染色鉴别内皮细胞)。3、细胞爬片。将洗净的盖玻片放入 6 孔培养板中,接种细胞为 3 ×10 4 个/ 孔, 48 小时候细胞可以长满,用镊子取出铺满细胞的盖玻片备用。4、细胞固定:用 PBS 洗涤细胞,之后放入乙醇丙酮混合液中,固定 10min ,空气中自然干燥。5、特异性抗体:按照说明书稀释比要求稀释抗体,加入抗体,放置 37℃ 孵育 60min 。6、洗涤: 1 × PBS (pH
的二抗50μl(异硫氰酸标记羊抗鼠IgG,北京),放入37℃2h后,用PBS洗涤3次。然后立即在荧光显微镜下观察,摄片。 血管内皮细胞鉴定结果: VWF相关抗原间接免疫荧光检查,原代及传代培养的内皮细胞浆中有黄绿色的荧光着色,胞核呈黑绿色,整个细胞轮廓清楚。作为对照的内皮细胞片子中,偶见绿色斑点散发荧光,未见细胞轮廓。 5.内皮细胞体外生长情况 用胰蛋白酶消化的人脐静脉内皮细胞,接种在24孔塑料培养板各孔内4h后,大部分细胞贴壁。早期细胞呈小多角、球形、呈团状,少数细胞伸展,48~72h
皱缩、彼此分离或呈大片状分离即可终止消化。加入含有10%小牛血清的培养液,吸管吹打,制成细胞悬液,计数后按105个细胞/ml,继续培养。 4.血管内皮细胞的鉴定 1) 倒置显微镜 观察细胞的形态特点。2)VWF相关抗原免疫荧光检查:在24孔塑料培养板孔内放置无菌的盖玻片0.5cm×0.6cm,每孔中种植1ml含有105个细胞的原代或传代内皮细胞悬液。待内皮细胞生长至近融合状态时,取出盖玻片,用PBS冲洗3次,投入冷丙酮中(-18~-20℃),细胞面向上,作用7min
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