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文献和实验相关专题 原理:转移电泳是将经聚丙烯酰胺凝胶电泳 分离出的蛋白质谱直接转移到硝酸纤维膜上,而形成固定相,并同时排除各种干扰物质,保持其天然构象和生物学活性,完成在凝胶中难以进行的各种生物试验。 材料 1.琼脂 糖 2.丙烯酰胺 3.甲叉双丙烯酰胺 4.十二烷基磺酸钠(SDS) 5.硝酸纤维膜滤纸 孔径0.45μm 6.琼脂 糖凝胶
Mol/L 甘氨酸—0.1%SDS(pH8.3)。8.蛋白质转移电泳缓冲液 25mMol/L Tris—192mMol/L 甘氨酸—20%甲醇(pH8.3)。9.溴乙啶溶液 称取5mg溴乙啶,用无离子水溶解。定容到10ml,取1ml稀释到1 000ml,最终浓度为0.5μg/ml。10.考马斯亮兰R-250染色液 0.25%考马斯亮兰R-250-10%醋酸-45%甲醇。11.氨基黑染色液 在含10%醋酸的甲醇中加入氨基黑10B至饱和。12.垂直板型及水平板型凝胶电泳槽13.转移电泳槽14.直流稳压
( pH8.3 )。 9 .溴乙啶溶液 称取 5mg 溴乙啶,用无离子水溶解。定容到 10ml ,取 1ml 稀释到 1 000ml ,最终浓度为 0.5ug/ml 。 10 .考马斯亮兰 R - 250 染色液 0.25 %考马斯亮兰 R - 250 - 10 %醋酸- 45 %甲醇。 11 .氨基黑染色液 在含 10 %醋酸的甲醇中加入氨基黑 10B 至饱和。 12 .垂直板型及水平板型凝胶
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