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文献和实验信号也很重要。在确定哪种显微镜物镜可以分辨标本的最小特征时,就需要考虑数值孔径。在权衡选项利弊时,请记住数值孔径范围在 0.04 至 1.7 之间。 3. 图像视场和景深要求是什么? 视场数或视场直径是光学显微镜中视场的直径,以毫米为单位,并在中间像平面测量。现代平场复消色差透镜和其他专用平场物镜通常具有 22 到 26.5 毫米(与广角目镜组合使用时或会更大)的可用视场。 物镜的景深即在图像锐度不发生明显变化情况下的物镜轴向聚焦范围。该值从低数值孔径物镜到高数值孔径物镜变化很大;通常随着数
,从而获得完整的肽段信息。因此,SWATH技术是一种真正全景式的、高通量的质谱技术。同时也解决了shot-gun鉴定较低重复度的缺点。此外,借助先进的Triple-TOF 5600质谱系统,SWATH在定量上具有较高的准确度和动态范围。与传统的基于质谱定量方法不同,基于SWATH技术的定量方法直接构建二级碎片离子的XIC,曲线上的每一个点都有充分的质谱证据,大大增加了定量的准确度和可重现性。科学家运用SWATH采集模式对酵母细胞全蛋白质的裂解液进行了分析,实验结果显示检测到蛋白质的丰度差异极大,跨越
经验分享|动物活体光学成像实验——荧光成像(四)【染料推荐】
荧光成像被广泛应用于生物学的各个方面,允许可视化的细胞和亚细胞生物过程的空间分辨率范围从纳米(nm)到厘米(cm)。动物体内荧光成像已成为临床前工作中最常用的检测手段之一。在考虑体内荧光成像在生物学研究中的应用时,研究人员应注意其内在的局限性。在某种程度上,这些限制与光与组织微观成分的相互作用有关。如:界面反射、散射、吸收和自发荧光等。体内荧光成像中,组织散射和吸收可以显著影响荧光团的测量光谱。 组织散射: 当整个动物被激发光照射或透射时,在激发光进入动物体和荧光团发射光的过程中经历了多次
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