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文献和实验一、原理 通常,我们可以利用烟草的瞬时表达系统来观察感兴趣蛋白的亚细胞定位(通过与绿色荧光蛋白构成融合蛋白)。同时,还可以检测蛋白的表达量。这一个过程是通过农杆菌作为一个工具将目的基因整合到到烟草的细胞内的。 二、材料与试剂 1. 携带表达载体的农杆菌菌株(通常表达载体由35S启动子驱动) 2. 2-4周的烟草植株 3. LB培养基 4. 乙酰丁香酮 5. 2-(N-吗啉代)乙磺酸 6. 抗生素 7. 注射器 三、仪器
(A. tumefaciens)。其致瘤特性是由Ti(tumor-inducing)质粒介导的。农杆根瘤菌之所以会感染植物根部是因为植物根部损伤部位分泌出酚类物质乙酰丁香酮和羟基乙酰丁香酮,这些酚类物质可以诱导Vir(Virulence region)基因的启动表达,Vir基因的产物将Ti质粒上的一段T-DNA 单链切下,而位于根瘤染色体上的操纵子基因产物则与单链T-DNA 结合,形成复合物,转化植物根部细胞。T-DNA 上有三套基因,其中两套基因分别控制合成植物生长素与分裂素,促使植物创伤组织无限制地生长与分裂,形成冠瘿
【求助】P53的翻译后修饰都有哪些? 怎样验证其修饰后与靶标启动子的结合活性的变化?
xiaozhangwei2 P53的翻译后修饰都有哪些?听说有磷酸化和乙酰化。还有其他的吗? 怎样找出P53是发生了哪种修饰变化? 如何设计实验验证P53修饰后,与靶标启动子结合时,有没有产生结合活性的变化啊? 谢谢! 大鹏鸟 p53的修饰 正常细胞在非应激状态下p53的水平和活性都较低,受到应激作用时,p53通过一系列的翻译后修饰被活化,并能结合特异的DNA序列。翻译后修饰是调节
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