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大量
- 供应商:
钰博生物
- 检测范围:
见说明书
- 检测方法:
酶联免疫
- 应用:
科研
- 样本:
血清/组织/尿液
1、小鼠胆固醇酯转移蛋白(CETP)检测试剂盒酶标分析过程中的注意事项
样本的检测是基于抗原抗体的反应,根据标准曲线,判定样本最终的药物含量。它要求加样的准确性和洗板的一致性。在整个加样的过程中注意实验室温度的恒定,保证反应在试剂盒所示的温度下进行。
2常见加样方式
A、吸一打二
B、吸二打一
在实际操作过程中,提倡用“吸二打一”用这种方式,有如下几个好处:
a、加样过程中在板孔内不出现或者很少出现气泡
b、提高加样速度,缩短前后样本反应的时间差。
在加样的过程中还应细心注意避免出现下列现象:
A、加样的过程中漏加或者重加;
B、加样的过程中忘记更换吸头;
C、样本的重加或者漏加;
D、忘记记录样本的加样顺序。
3小鼠胆固醇酯转移蛋白(CETP)检测试剂盒常见的洗板方式
A、洗板机洗板;
B、多道孔加样器洗板;
C、多孔吸头洗板;
在洗板的过程中,确保每孔所加洗涤液量的均一,按说明书操作,不可过多,避免溢出板孔,污染其它样本;过少,则达不到洗涤的效果,容易出现曲线不成线性,花板等情况。
4 甩板
快速甩尽板孔内的液体,防止板孔里的液体对流或反溅回板孔中产生交叉污染。
5拍板
轻轻的在吸水纸上扣干板孔内的液体,而且吸水纸只能使用一次。
6 显色
值得注意的是,并非试剂盒中所规定的显色时间是绝对的,因为小鼠胆固醇酯转移蛋白(CETP)检测试剂盒的吸光度值会受环境中的温度、湿度、酶标板反应时所接触到的物品的导热度等有关,实验操作人员在加完显色液后,可根据颜色的深浅适当的延长或者缩短显色时间。防止出现吸光值接近或高于酶标仪的最高检测灵敏度(OD值在2.5-3.0之间),这样会间接影响到检测结果,如出现曲线前半部份梯度不明显或颠倒数值等现象,也就造成了一些假阳性或部分检测结果偏低的现象。
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文献和实验血浆胆固醇酯转移蛋白(cholesterolestertransferprotein,CETP)
。 CETP促进各脂蛋白之间脂质的交换和转运。CETP在完成和促进胆固醇逆转过程中充当着重要的角色。周围组织细胞膜的游离胆固醇与HDL结合后,被LCAT酯化成胆固醇酯,移入HDL核心,并可通过CETP转移给VLDL、LDL,再被肝的LDL及VLDL受体摄取入肝细胞,至此,完成了胆固醇从周围末梢组织细胞经HDL转运到肝细胞的过程,称之为胆固醇的逆转运(reversecholesteroltransport,RCT)。
,导致细胞内多余的胆固醇外流。这一过程由Apo A1和SR-B1介导。 在LCAT的转移作用下,HDL的核心CE含量逐步增加,新生的圆盘状HDL向球状HDL转变。球状HDL也可以通过CETP将CE转移到富含甘油三酯的脂蛋白(如极低密度脂蛋白),之后经过低密度脂蛋白(LDL)受体进入肝脏进行代谢,肝脏摄取的CE可进一步合成胆汁酸排出体外。在肾上腺、睾丸和卵巢,HDL也可通过其表面受体SR-B1接受HDL中的CE作为合成类固醇激素的原料 。 此外,HDL还可抑制LDL的氧化过程,共同
VLDL大小为30-80nm,含有甘油三酯、胆固醇、胆固醇酯和磷脂,TG占50%左右,蛋白质部分为ApoAⅠ、AⅣ、B100 、C、E等。VLDL在肝脏合成,利用来自脂库的脂肪酸作为合成材料,其中胆固醇来自CM残粒及肝自身合成的部分。ApoB100 全部由肝合成,肝合成的VLDL分泌后经静脉进入血液,再由VLDL内ApoCⅡ激活LPL,并水解其内的TG。由HDL的LCAT作用生成的胆固醇酯经CETP转送给VLDL进行交换,而VLDL中余下的磷脂、ApoE、C转移给HDL
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