- ￥3055
- Pierce™
- 美国
- 88946
- 2025年07月17日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
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-20°C
- 保质期：
见产品外包装
- 英文名：
Pierce™ HRV 3C 蛋白酶溶液试剂盒（2 单位/μL）
- 库存：
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- 供应商：
嵘崴达
- CAS号：
见产品外包装
- 规格：
1000 U
Pierce™ HRV 3C 蛋白酶溶液试剂盒（2 单位/µL）
货号: 88946
Thermo Scientific Pierce 人鼻病毒 (HRV) 3C 蛋白酶是一种重组半胱氨酸蛋白酶，可去除含 HRV 3C 蛋白酶切割位点序列的蛋白中的融合标签，该蛋白酶带有双重标签，切割完成后很容易从样品中去除。
Thermo Scientific Pierce HRV 3C 蛋白酶的特点：
•有效— HRV 3C 专门用于去除目标蛋白中的纯化标签
•4 °C 下具有高活性 —切割活性可达到 ≥2000 U/mg 质控蛋白；每单位蛋白酶可切割 0.1 mg 质控蛋白（在 4°C 下作用 16 h）
•灵活— 带有双重标记，可与各种色谱柱和缓冲液兼容
特性：
• 别名：人鼻病毒 3C
• 来源：大肠杆菌 (E.coli)
• 分子量：47.8 kD
• 形式：液体
•蛋白酶类型：半胱氨酸
•反应条件：50 mM Tris-HCl、150 mM NaCl，pH 值 8.0
Pierce HRV 3C 蛋白酶对 Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓Gly-Pro 识别序列具有非常高的特异性，其切割位点位于谷氨酰胺残基之后。此重组酶经工程设计为一种含有谷胱甘肽-S-转移酶 (GST) 和多聚组氨酸 (6xHis) 标签的融合蛋白，从而在切割完成后，可借助各种含固定化谷胱甘肽 (GSH) 或金属螯合物的固相支持物将该蛋白酶轻松去除。此外，HRV3C 可在各种常用缓冲液中发挥活性，进一步提高了实验设计的灵活性。
应用：
• 从融合蛋白中去除纯化标签
| 88946 | Pierce™ HRV 3C 蛋白酶溶液试剂盒（2 单位/µL） | 1000 U |
| 88947 | Pierce™ HRV 3C 蛋白酶溶液试剂盒（2 单位/µL） | 10000 UNITS |
| 88951 | alamarBlue Cell Viability Assay Reagent | 25 mL |
| 88952 | alamarBlue Cell Viability Assay Reagent | 100 mL |
| 88953 | LDH Cytotoxicity Assay Kit | Kit |
| 88954 | LDH Cytotoxicity Assay Kit | Kit |
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文献和实验发光基团pNA游离出来，可通过酶标仪或分光光度计（λ=405nm 或400nm）测定其吸光值，通过测定吸光度来检测Caspase的活性。 二、自备试剂 PBS、蛋白定量试剂盒(Bradford法,选用) 三、实验操作指南 1．准备工作： A、 裂解液溶解后混匀，冰浴备用。 B、 裂解液工作液制备：每50 μL裂解液中加入0.5 μL DTT，冰浴备用。 2．样本处理： A、悬浮细胞 1） 诱导完成后的细胞，2000 rpm离心5 min，弃上清，收集细胞，PBS轻轻重悬细胞并计数
方法。 收获细胞（保证健康的单细胞悬液）。 使用胰蛋白酶-EDTA 溶液 ( T3924 ) 分离上述贴壁细胞。Millicell® Digital Cell Imager（MDCI10000）观察到细胞融合度应为80-90%，且状态良好。 以300 x g离心细胞悬液 5分钟并吸出上清液。将细胞重悬于少量培养物中，例如 3-5 mL 的 3dGRO™ 球状体培养基 ( S3077 ) 注：可让细胞穿过40 µM细胞过滤器或带细胞过滤器卡扣盖的5 mL 圆底聚苯乙烯试管，以实现单细胞悬浮。
一、SP 法 1）脱蜡、水化；2）PBS 洗 2～3 次各 5 分钟；3）3% H2O2（80% 甲醇）滴加在 TMA 上，室温静置 10 分钟；4）PBS 洗 2～3 次各 5 分钟；5）抗原修复；6）PBS 洗 2～3 次各5分钟；7）滴加正常山羊血清封闭液,室温 20 分钟。甩去多余液体。8）滴加Ⅰ抗 50μl，室温静置 1 小时或者4℃过夜或者37℃1小时。9）4℃ 过夜后需在37℃复温45分钟。10）PBS 洗 3 次各 5 分钟；11）滴加 Ⅱ 抗 40～50 μl，室温
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