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- YB-E13320
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 供应商：
钰博生物
- 检测范围：
见说明书
- 检测方法：
酶联免疫
- 应用：
科研
- 样本：
血清/组织/尿液
（1）已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）；
（2）酶标记的抗原或抗体（结合物）；
（3）酶的底物；
（4）阴性对照品和阳性对照品（定性测定中），参考标准品和控制血清（定量测定中）；
（5）结合物及标本的稀释液；
（6）洗涤液；
（7）酶反应终止液。
一、免疫吸附剂
已包被抗原或抗体的固相载体在低温（2~8℃）干燥的条件下一般可保存6个月。有些不完整的试剂盒，仅供应包被用抗原或抗体，检测人员需自行包被。以下简述固相载体和包被过程。
兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)检测试剂盒实验步骤
一、预试验
（一）抗体包被的酶标板的制备
1.以碳酸盐缓冲液将抗体稀释成适当浓度（参考：5ug/ml），加入酶标板（50ul/孔），以胶带封口，于4℃过液。
2.弃抗体液，以双蒸水冲洗3次，自然干燥后以胶带封口。此为由已知抗体包被的酶标板，备用。
（二）底物浓度的摸索
在底物缓冲液中加入不同量的底物（参考：5mg/10ml），加入酶标板中（50ul/孔），以胶带封口，37℃避光保存2h，在没有明显变色的条件下选择尽可能大的底物浓度。
（三）酶标抗原浓度的摸索
选择明确为阴性的标本，加至已包被抗体的酶标板中（50ul/ 孔）；用稀释液稀释酶标抗原至适当倍数（参考：40~4000倍），同时加入酶标板中（50ul/ 孔），混合后封口后于37℃作用30min。以洗液连续冲洗5次，然后于吸水纸上拍干，加入已摸索好的底物封口后于37℃作用30min，在保持有明显变色的条件下选择尽可能小的酶标抗原浓度。
二、兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)检测试剂盒正式试验
1. 以稀释液将待检标本做适当稀释（预试中确定）加入包被有已知抗原的酶标板中（50ul/孔），加封口胶带于37℃作用30min。
2. 弃反应液，以冲洗液连续洗板5次并于吸水纸上拍干。
3. 加入酶标抗体（浓度在预试中确定）。加封口胶带后于37℃作用30min。
4. 重复第2步。
5. 加底物（浓度在预试中确定），加封口胶带后于室温下避光作用5-60 min，其间不时观察，显色满意后加终止液50ul/孔。
6. 于酶标仪测定OD值，OPD用492nm测定，TMB用450nm测定。
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文献和实验蝰蛇蛇毒是一种强烈的因子X激活剂，同兔脑凝血活酶，不同之处在于不需要因子VII参与而起作用，它可与因子V、X及PF3形成一种复合物进而使血液凝固，蛇素时间延长见于纤维蛋白原、凝血酶原、因子V、X减少，血小板减少及血小板病（PF3活性减低或释放不良），血循环中有抗凝物质肝素、FDP等。 蛇毒时间缩短可见于血小板增多症及血脂过高状态医学教|育网搜集整理。 如果蛇毒时间正常而凝血酶原时间延长表示因子VII缺乏，蛇毒时间及凝血酶原时间均延长，则提示有因子X缺乏的可能，这是本试验
【参考值】 13～14秒，延长3秒以上有意义。 【临床意义】 蝰蛇蛇毒是一种强烈的因子X激活剂，同兔脑凝血活酶，不同之处在于不需要因子VII参与而起作用，它可与因子V、X及PF3形成一种复合物进而使血液凝固，蛇素时间延长见于纤维蛋白原、凝血酶原医学教育网|搜集整理、因子V、X减少，血小板减少及血小板病（PF3活性减低或释放不良），血循环中有抗凝物质肝素、FDP等医|学教育网搜集整理。 蛇毒时间缩短可见于血小板增多症及血脂过高状态。 如果蛇毒时间正常
活化部分凝血活酶时间测定 【参考范围】21.5～36.5s（全自动凝血仪法）。 【影响因素】1.采血时穿刺尽量一针见血，不要淤血和气泡，采血后立即与抗凝剂混合，尽快送往实验室，标本要及时检测，最迟不超过2h.使用枸橼酸钠（抗凝）血浆。 2.分离血浆时，离心速度和时间要够，务必除去血小板，医学教|育网搜集整理特别是用于肝素治疗监测时，因为残留血小板中的PF4可影响肝素的效应。并且此时最好用塑料管收集血液，以免玻璃管引起血小板释放PF4. 3.如果不能立即测试，应
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