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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 英文名:
Recombinant Neuropeptide FF (NPFF)
- 库存:
大量
- 供应商:
钰博生物
- 规格:
1mg
●提供范围最广、各种属细胞表达的种属源蛋白
●最好的保留了蛋白质的结构、翻译后修饰和功能
●>经亲和纯化得到,纯度>95%
●可以进行大规模制备
应用领域
●作为天然抗原,应用于生产高质量抗体
●抗体分析中作为阳性对照
●ELISA和其他分析方法中作为标准品使用
●蛋白-蛋白相互作用
●体外生化分析和蛋白功能分析
YBio(钰博生物)提供活性高、稳定性强的人、小鼠、大鼠的重组细胞因子产品。主要包括白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子、集落刺激因子、生长因子、趋化性细胞因子以及肿瘤坏死因子配体/受体和防御因子等。YBio(钰博生物)重组细胞因子产品是通过大肠杆菌、哺乳动物细胞和昆虫细胞等表达系统获得的无标签蛋白,可以满足不同的研究需要。产品经过纯度、活性与内毒素检测,可以满足不同的应用需要。
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文献和实验一、融合表达蛋白的纯化:融合表达蛋白可以在原目标分子之外带有GST肽段或(His)6肽段,从而使得可以分别用Glutathione Sepharose凝胶或Chelating Sepharose凝胶进行亲和色谱分子,一步可以达到~90%的纯度,经过特异蛋白酶切后,再进行离子交换及高分辨凝胶过滤一般便可以达到所需的纯度(95~99%)。二、包含体表达蛋白的纯化:在E.coli系统表达重组蛋白,表达量高时,常形成包含体,包含体易于与细胞其他组分分离,但需要注意的是蛋白复性的步骤。一般采用盐酸胍溶解
【原创】Protein A Sepharose 之进化篇。。。
洗脱条件比较剧烈,最后收集的蛋白质很有可能变性,或者是复性困难。 这种洗脱条件剧烈的Protein A 柱结合的重组蛋白质A一般具有5个串联结构域:E、D、A、B、C。这种重组蛋白A虽然除去了不重要的非结合域,仅由5个结构域组成,每个域均可以和IgG的Fc段结合,但不同的域结合强度略有差异。因此洗脱条件不均一,而且经常需要较低的pH值。如果减少串联结构域的个数,并且采取同型结构域串联,就可以避免不同结构域与抗体Fc 段亲和性的差异,洗脱条件会温和而均一。为此,我们可以做一个试验,比较一下
用蛋白或多肽标签融合于重组蛋白中,进而方便重组蛋白的纯化和检验。小分子标签通常免疫原性较低,且不影响目标蛋白功能而得以保留。但是大分子标签如 GST 因其对目标蛋白的结构和生物活性有所影响,通常需要去除。 今天我们就来聊一聊柱上酶切那点事儿~ 什么是柱上酶切 柱上酶切纯化路线是指在吸附了标签蛋白的层析柱上添加蛋白酶进行在位去除标签,具有更加灵活、高效、快速的特点。 相比于常规的洗脱后的酶切纯化路线,柱上酶切不仅可以简化酶切后的再次上样操作,同时可以尽量避免操作过程中目标
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