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- 英文名:
Pierce™ HA-Tag IP/Co-IP Kit
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- 供应商:
嵘崴达
- CAS号:
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- 规格:
1 个试剂盒
Pierce™ HA 标签 IP/Co-IP 试剂盒
货号: 26180
Thermo Scientific Pierce HA 标签 IP/Co-IP 试剂盒提供使用 HA 标签诱饵蛋白进行免疫沉淀 (IP) 或免疫共沉淀 (Co-IP) 反应所需的亲和树脂、阳性对照品和其他试剂。
HA 标签 IP/Co-IP 试剂盒的特点:
•经改良—更新后的试剂盒包括更加固定的抗体树脂和改良方案以及作为阳性对照品的 GST-PI3K-SH2-HA 融合蛋白
•特异性—高特异性抗 HA 单克隆抗体可提供高得率的免疫沉淀产物及清洁的 Western 印迹检测
•兼容—包括适用于多种洗脱条件的方案和试剂,以适应不同的蛋白灵敏度和下游应用
•稳健—该试剂盒和抗 HA 琼脂糖与各种细胞裂解物和生理(非变性)缓冲系统兼容
•简单、便利—全套试剂盒包括所有必要试剂、便利的离心柱和易于遵循的说明
该试剂盒以共价固定了高特异性抗 HA 抗体的交联微珠状琼脂糖为基础。即用型亲和树脂以及所含缓冲液、微量离心柱、阳性对照品和易于遵循的说明构成了足以进行 25 次 IP 或 Co-IP 测定的全套试剂。在培养出含有标记融合蛋白质的样本后,在琼脂糖微珠上捕捉到含有HA标记诱饵蛋白质的相互作用复合物。简单洗涤步骤后,在提供的洗脱缓冲液或 SDS-PAGE 上样缓冲液中易于从树脂中洗脱特异性蛋白相互作用复合物,以进行后续分析。
源于人流感病毒 HA 蛋白的血凝素 (HA) 肽 (YPYDVPDYA) 是几种用于重组蛋白表达的融合蛋白标签之一。利用特异性、高亲和力固定化抗体,HA 标签融合蛋白可从细菌和哺乳动物细胞裂解物以及 Pierce 人体外翻译反应液中快速纯化。对于免疫共沉淀反应,简单的洗涤步骤可在提供的洗脱缓冲液或 SDS-PAGE 上样缓冲液中富集和洗脱特异性蛋白相互作用复合物,以便进行后续分析。
| Pierce | 26180 | Pierce HA-Tag IP/Co-IP Kit | Kit |
| Pierce | 26181 | HA Epitope Tag Antibody, Agarose conjugate (2-2.2.14) | 1 mL |
| Pierce | 26182 | HA Epitope Tag Antibody, Agarose conjugate (2-2.2.14) | 5 mL RESIN |
| Pierce | 26183 | HA Epitope Tag Antibody (2-2.2.14), 100 ug. | 100 UG |
| Pierce | 26184 | Pierce HA Peptide | 5 MG |
| Pierce | 26196 | Pierce NHS-Activated Agarose, Dry | 1 G |
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文献和实验常见表位标签和序列常用表位标签的生物化学特性总结如下:氯霉素乙酰转移酶(CAT)这个 24kDa 大小的标签也用作报道基因,与大多数蛋白质融合时依然能保留其活性。这意味着它可以用来直接测量表达水平,而不需要 PAGE 或免疫检测。二氢叶酸还原酶(DHFR)这个 25kDa 蛋白质参与胸苷生物合成途径。带有这个标签的蛋白质的纯化可以通过甲氨蝶呤连接的树脂实现。FLAG带电的八肽序列(DYKDDDDK),可用于蛋白检测,特别是在串联为 3xFLAG™表位(DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDK
大阪大学蛋白质研究所藤井勇树、高木淳一东北大学大学院医学系研究科金子美华、加藤幸成 前言在分析蛋白质的功能时最重要的是如何得到高纯度的蛋白。现今提纯蛋白最常用的方法是亲和标签系统。被统称为「Epitope Tag」的肽标签以及其单克隆抗体组成的系统有FLAG、HA、Myc等多种标签。但是,每个标签系统都有优缺点,并不存在完美的标签系统。于是,在克服了众多难关后我们终于开发出有超高亲和性的新型亲和标签系统“PA Tag System”1)。 PA tag的起源Epitope Tag
了编码 HA-BDCA-2 载体的小鼠 B 前体细胞后,提取的蛋白使用 SDS-PAGE 的方法进行检测。 蛋白免疫共沉淀(co-IP)与染色质免疫共沉淀(ChIP) μMACS Protein A/G MicroBeads 专为蛋白质免疫共沉淀分析而开发,免疫复合物 30 分钟即可形成并得到磁性分离。 在强磁场的分离柱中进行润洗,可保证背景充分去除,即便是弱结合的蛋白复合物依然可得到充分分离。传统免疫共沉淀工作流程需要抗体孵育过夜,相比之下 MACS Techology 可令实验时间缩短
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