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- 英文名:
EZ-Link™ Sulfo-NHS-LC-Biotin
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嵘崴达
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- 规格:
100 mg
EZ-Link™ Sulfo-NHS-LC-生物素
货号: 21335
Thermo Scientific EZ-Link Sulfo-NHS-LC-生物素是一种中等长度的水溶性生物素化试剂,可用于标记具有伯胺的抗体、蛋白和其他分子。
EZ-Link Sulfo-NHS-LC-生物素的特点:
•蛋白标记—生物素化抗体便于使用链霉素亲和素树脂或探针进行固定、纯化或检测
• 细胞表面标记—仅对全细胞的表面蛋白进行生物素化,因为带负电荷的试剂不会渗透细胞膜
• 胺反应性—与伯胺 (-NH2)(如赖氨酸侧链或多肽的氨基末端)发生反应
• 可溶性—与普通 NHS 酯化合物相比带电荷的 sulfo-NHS 基团可提高试剂的水溶性
• 不可逆—形成永久酰胺键;间隔臂不可切割
• 中等长度—间隔臂(添加至靶标的总长度)为 22.4 埃;可在足够长度(生物素结合的空间位阻极小)与适当质量之间提供出色平衡
Sulfo-NHS-LC-生物素是三种非常相似的 EZ-Link 试剂中一种,该等试剂具有水溶性,不可切割,且在溶液中可实现抗体、蛋白和任何其他含伯胺大分子的简单高效生物素化。对于这些独特的水溶性、膜不渗透性试剂,细胞表面蛋白的特异性标记是另一种常见应用。只有间隔臂长度不同,三种 Sulfo-NHS 酯试剂可优化标记和检测实验,实验中生物素结合的空间位阻是重要因素。Sulfo-NHS-LC-生物素以多种包装规格和全套蛋白标记试剂盒形式提供。
| 21335 | EZ-Link™ Sulfo-NHS-LC-Biotin | 100 MG |
| 21336 | EZ-Link™NHS-LC-Biotin | 50 MG |
| 21338 | EZ-Link™ Sulfo-NHS-LC-LC-Biotin | 50 MG |
| 21339 | EZ-Link™ Hydrazide-Biotin | 100 MG |
| 21340 | EZ-Link™ Biotin-LC-Hydrazide | 50 MG |
| 21341 | EZ-Link™ HPDP-Biotin | 50 MG |
| 21343 | EZ-Link™ NHS-LC-LC-Biotin | 50 MG |
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做 ChIP(Chromatin Immunoprecipitation)已经几个月了,虽时间不长,但深刻体会细节决定成败,这里就把自己认为值得注意的细节总结如下: 1、cell counting:尽量做到准确,会影响 input 结果。 2、cross link:甲醛的终浓度是 1%,这个基本所有的 protocol 上都会强调。 3、resuspend cells with SDS:一定要选用小的 tip 头,在液面下吹打,否则很容易产生气泡,后面的 sonication 就麻烦
下面的操作方法可以使约3~5分子的生物素与1分子的蛋白结合,对某些蛋白来说,生物素与蛋白的分子比可根据不同的生物素化要求进行调整。 1. 溶解2~10 mg 蛋白于1 ml 的BuphTm磷酸盐缓冲液中,并计算溶解的毫摩尔数。如果蛋白含有不恰当的缓冲液(如Tris或者甘氨酸),可以通过在PBS中透析或浓缩的方法除去。计算:蛋白质量(mg)/蛋白分子量(MW)=蛋白质的毫摩尔数。 2. 在打开之前,平衡生物素至室温。加2 mg Sulfo-NHS-Biotin于100 ul
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