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- 详细信息
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- 英文名:
Pierce™ 亲和素,荧光素 (FITC) 偶联物
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- 供应商:
嵘崴达
- CAS号:
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- 规格:
5 mg
货号: 21221
Thermo Scientific Pierce FITC 偶联亲和素是来自鸡蛋蛋清的纯化亲和素蛋白,能有效结合生物素,这是一种常用来标记抗体和其他免疫检测方法探针的标签。
Pierce 亲和素的特点:
•天然亲和素—来自鸡蛋蛋清的糖蛋白,67kDa,pI = 10
• 可溶性—糖基化和等电点使亲和素的可溶性高于链霉素亲和素
• 实惠—价格显著低于重组链霉素亲和素
• ABC 染色—免疫组织化学技术 (IHC) 中,对于亲和素-生物素复合物 (ABC) 染色方法,亲和素通常优于链霉素亲和素
• 纯蛋白—选择纯未结合亲和素用于 ABC 染色
亲和素是一种存在于蛋清和禽类、爬行动物和两栖动物组织中的糖蛋白。该蛋白包含四个相同的亚单元,其分子质量合计为 67,000 至 68,000 道尔顿。每个亚单元结合一分子生物素,研究表明色氨酸和赖氨酸涉及了生物素的结合位点。亚单元测序表明其由 128 个氨基酸组成。亲和素的等电点为 10-10.5,并且在水和盐溶液中具有很强的溶解性。亲和素在较宽的 pH 值和温度范围内保持稳定。全面的化学修饰对亲和素活性的影响很小,这一点对于检测和蛋白纯化很有用。
| 21221 | Pierce™ 亲和素,荧光素 (FITC) 偶联物 | 5 MG |
| 21224 | Streptavidin, Fluorescein (FITC) Conjugated荧光素(FITC)标记的链霉亲和素 | 1 MG |
| 21230 | Clean-Blot IP Detection Reagent (HRP)清洁污点IP检测试剂(HRP) | 2.5mL |
| 21232 | Clean-Blot IP Detection Kit (HRP)清洁污点IP检测试剂盒(HRP) | 25-blot Kit |
| 21277 | Pierce His Protein Interaction Pull-Down Kit | Kit |
| 21303 | EZ-Link TFPA-PEG3-Biotin | 25 MG |
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文献和实验当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时,主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合,形成FITC-蛋白质结合物,即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基,一般最多能结合15~20个,一个IgG分子可结合2~8个分子的FITC,其反应式如下FITC-N=C=S + N-H2-蛋白质 → FITC-NS-C-N-H2-蛋白质常用Marsshall(1958)法标记荧光抗体,也可以根据条件采用Chadwick等标记法或Clark
(一) 原理 目前用于抗体标记的荧光素主要有异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或罗 达明(Lissamine rhodamine B200, RB200)。在硷性条件下FITC的碳酰胺键可与抗体赖氨酸的ε 氨基共价结合,标记后的抗体仍保持与相应抗原结合的能力。在荧光灯源紫外线或兰紫光 激发下产生黄绿色荧光,通过在荧光显微镜下观察或流式细胞仪分析可对相应抗原进行定 性、定位或定量
材料: 抗体球蛋白溶液、0.5mol/L pH9.0碳酸盐缓冲液、无菌生理盐水、异硫氰酸荧光素、1%硫柳汞水溶液、三角烧瓶(25—50ml)、冰及冰槽(或1000ml烧杯)、电磁搅拌器、灭菌吸管、透析袋、玻璃棒、棉线及烧杯(500ml)、pH7.2或8.0的0.01mol/L PBS等。 方法与步骤: 1. 抗体的准备。量取适量已知浓度的球蛋白溶液,置入三角烧瓶中,加入生理盐水及碳酸盐缓冲液,使最终球蛋白
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