- ￥3300
- bersee®博尔西
- 中国
- BTR201Q
- 2026年02月28日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
4-8℃保存
- 保质期：
3年
- 英文名：
rat-Protein A Berpharose FF
- 库存：
大量
- 供应商：
北京博尔西科技有限公司
- 规格：
10ml
特点：经多厂家验证多克隆抗体，单克隆抗体纯化载量高
耐碱性蛋白A琼脂糖凝胶FF
（rat-Protein A Berpharose FF）
1.产品介绍
同普通蛋白A琼脂糖凝胶相比，耐碱蛋白A琼脂糖凝胶FF大大提高了凝胶的耐碱性，可以使用0.1-0.5MNaOH溶液去除热源或对凝胶进行清洗。琼脂糖凝胶骨架上的延伸碳臂和重组耐碱蛋白A上的定向结合位点的设计保证了两者之间的定向牢固键合以及耐碱蛋白A同抗体间的高效亲和能力。
2.规格
1ml（预装柱）、5ml（预装柱）、10ml、25ml、100ml、500ml、1L
3.产品性能
| 性能 | 指标 |
| 基质 | 4%琼脂糖微球 |
| 配基 | 重组耐碱蛋白A |
| 配基密度 | >6mg/ml |
| 载量 | ≥35mg人IgG /ml |
| 粒径 | 45-165μm |
| *大耐压 | 0.3Mpa |
| 推荐流速 | 50-300 cm/h |
| pH稳定范围 | 3-12 |
| 储存缓冲液 | 20%乙醇 |
| 储存温度 | 4-8℃ |
| 种类 | 亚类 | 蛋白A | 蛋白G | 蛋白A蛋白G融合蛋白 |
| 人 | IgG1 | +++ | +++ | +++ |
| IgG2 | +++ | +++ | +++ | |
| IgG3 | + | +++ | +++ | |
| IgG4 | +++ | +++ | +++ | |
| IgM | + | - | + | |
| IgD | - | - | - | |
| IgA | + | - | + | |
| Fab | + | + | + | |
| 兔 | IgG | +++ | ++ | +++ |
| 山羊 | IgG1 | + | +++ | +++ |
| IgG2 | +++ | +++ | +++ | |
| 牛 | IgG1 | + | +++ | +++ |
| IgG2 | +++ | +++ | +++ | |
| 小鼠 | IgG1 | + | +++ | ++ |
| IgG2a | +++ | +++ | +++ | |
| IgG2b | +++ | +++ | +++ | |
| IgG3 | ++ | +++ | +++ | |
| IgM | - | - | - | |
| 大鼠 | IgG1 | + | ++ | ++ |
| IgG2a | - | +++ | +++ | |
| IgG2b | - | + | + | |
| IgG2c | +++ | +++ | +++ | |
| 猪 | IgG | +++ | ++ | +++ |
| 犬 | IgG | +++ | + | +++ |
| 鸡 | IgY | - | - | - |
| 马 | IgG（ab） | + | ++ | + |
| IgG（c） | + | ++ | + |
应用举例：
结合缓冲液：20mM磷酸缓冲液、150mMNaCl、pH7.0
洗脱缓冲液：0.1M甘氨酸，PH3.0或0.1M柠檬酸缓冲液，pH 4.0
中和缓冲液：1 M Tris-HCl，pH 8.5
1) 1ml耐碱蛋白A琼脂糖凝胶FF预装柱用5-10个柱床体积的蒸馏水洗去保存液。
2)用结合缓冲液平衡5-10个柱床体积。
3)将5ml人多抗血清用结合缓冲液稀释到50ml，0.45μm滤膜过滤上样。
4)用结合缓冲液再洗5-10个柱床体积。
5)用洗脱缓冲液洗脱抗体，收集洗脱峰，并用中和缓冲液调节其pH至中性。
6)每次使用后依次使用3个柱体积的结合缓冲液，5个柱体积的去离子水， 5 个柱体积的 20%的乙醇平衡保存，防止填料被细菌污染。
7) SDS-PAGE电泳分析。
6.注意事项
1)样品洗脱后一般pH很低，应立刻用碱性中和缓冲液（如1MTris-HCl，pH8.5）将收集到的抗体溶液中和到中性，或在收集容器中事先装5-10%、pH7.5的缓冲液（如1MTris-HCl或1M磷酸缓冲液），以利于维持抗体的生物活性，避免抗体失活。
2)使用时保证柱子和缓冲液的温度一致，避免柱床内产生气泡，影响纯化效果。
3)填料再生清洗：随着一些变性物质的沉淀和蛋白的聚集，往往造成流速和结合载量下降，严重影响纯化效果，这时需要对填料进行再生清洗（如下步骤）：先用3 倍柱体积的结合缓冲液清洗，然后用至少 2 倍柱体的 0.1-0.5 M NaOH清洗，接触时间为 15 min，最后用5 倍柱体积的结合液冲洗。（注：因 0.1–0.5 M NaOH 粘度大易造成压力增加，可进行反向冲洗。）
4)本产品保存条件：20%乙醇，4-8℃。
层析柱(预装柱)填料目录：
亲和层析填料(预装柱)
★蛋白A琼脂糖凝胶 FF (Portein A Berpharose FF)
★蛋白G琼脂糖凝胶 FF (Portein G Berpharose FF)
★耐碱蛋白A琼脂糖凝胶 FF (rat-Portein A Berpharose FF)
★蛋白A蛋白G琼脂糖凝胶 FF (Portein AG Berpharose FF)
★镍-琼脂糖凝胶FF (Ni- Berpharose FF)
★链霉亲和素琼脂糖凝胶 FF (Streptavidin Berpharose FF)
★Strep-Tactin琼脂糖凝胶 FF (Strep-Tactin Berpharose FF) (StrepII标签蛋白纯化)
★肝素-琼脂糖凝胶 FF (Heparin- Berpharose FF)
★大豆胰蛋白酶抑制剂琼脂糖凝胶 FF (STI- Berpharose FF)
内毒素清除琼脂糖凝胶 (Endotoxin Removal Reagent Berpharose)
GST-琼脂糖凝胶FF (GST Berpharose FF)
钴-琼脂糖凝胶FF (Co- Berpharose FF)
真菌毒素检测免疫亲和柱
黄曲毒素（总量：B族G族、M1、B1）- 免疫亲和柱 (AFT-IAC)
赭曲霉毒素A-免疫亲和柱 (OTA-IAC)
玉米赤霉烯酮-免疫亲和柱 (ZEA-IAC )
脱氧雪腐镰刀菌烯醇（呕吐毒素）-免疫亲和柱 (DON-IAC)
T-2毒素-免疫亲和柱 (T-2 toxin-IAC)
伏马毒素-免疫亲和柱 (FB1、FB2、FB3-IAC)
活化填料
NHS活化琼脂糖凝胶 FF (NHS Activated Berpharose FF)
环氧活化琼脂糖凝胶 FF ( Epoxy Activated Berpharose FF)
离子交换层析填料(预装柱)
DEAE-琼脂糖凝胶 FF（DEAE Berpharose FF）
Q-琼脂糖凝胶FF（Q Berpharose FF）
CM-琼脂糖凝胶FF（CM Berpharose FF）
SP-琼脂糖凝胶FF（SP Berpharose FF）
DEAE、Q、CM、SP（预装柱套装4支）
疏水层析填料(预装柱)
苯基-琼脂糖凝胶 FF（Phenyl Berpharose FF）
辛基-琼脂糖凝胶 FF（Octyl Berpharose FF）
丁基-琼脂糖凝胶 FF（Butyl Berpharose FF）
苯基、辛基、丁基（预装柱套装3支）
凝胶过滤层析填料(预装柱)
| 型号 | 分离范围 |
| 琼葡糖凝胶G10 | <700 |
| 琼葡糖凝胶 G15(脱盐柱) | 100-1500 |
| 琼葡糖凝胶 G25 (脱盐柱) | 1000-5000 |
| 琼葡糖凝胶 G50 | 1000-30000 |
| 琼葡糖凝胶 G75 | 3000-80000 |
| 琼葡糖凝胶 G100 | 4000-120000 |
| 琼葡糖凝胶 G150 | 5000-300000 |
| 琼葡糖凝胶 G200 | 5000-600000 |
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文献和实验【原创】Protein A Sepharose 之进化篇。。。
[img][/img]Protein A 柱之进化 Protein A是一种金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白质，能特异性地与人和哺乳动物抗体（主要是IgG）的Fc区结合。因而，将Protein A 与琼脂糖凝胶以一定的方式结合，可制备用于抗体纯化的亲和填料。 早期的Protein A柱结合的都是天然Protein A。天然Protein A由5个IgG结合域和其它未知功能的非Fc结合域组成，分子量约42KD，结构如图1所示。这种柱子对IgG的亲和能力很强，可以吸附大量的lgG。但同时，天然
珠子对照样品外每个样品中加入一抗，抗体的量按照以往经验来加，1-10ug的抗体/25ugDNA效果较好。3加入20ul的proteinA/G珠子（预先用超声处理成为单链的鲱精DNA和BSA吸附，详见步骤4.3a）到所有样品总，4°C摇转IP过夜。3a将蛋白A/G珠子与单链鲱精DNA进行预处理。如果同时使用蛋白A珠子和蛋白G珠子，等体积混合这两种珠子使用RIPA溶液洗3次。除去RIPA溶液，加入单链鲱精DNA到珠子终浓度为75ng/μl，再用BSA将珠子终浓度定到0.1μg/μl。加入两倍珠子
琼脂糖凝胶电泳片断回收的常用方法20世纪70年代是一个奠定现代分子生物学的时代，1973年冷泉港实验室的Joseph Sambrook和Phillip Sharp发明了利用琼脂糖凝胶分离DNA 和EB染料观测DNA 相结合的技术。现在，琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离、鉴定和纯化核酸和蛋白质片断的标准方法。这里首先介绍的是琼脂糖凝胶电泳片断回收的常用方法：1.柱回收试剂盒：可谓目前最简单快速的回收方法，只需要将电泳凝胶中的产物条带切下，用溶解Buffer彻底溶解，上包埋有纯化填料的纯化柱，离心
