10倍蔗糖核酸电泳上样缓冲液

核酸电泳工作流程——5 大主要步骤

X 的原液)。上样缓冲液包括如下组分: 密度成分，如甘油或蔗糖，增加样品粘度，确保样品沉入孔中。 盐，如 Tris-HCl，为样品创造良好的离子强度和 pH 值环境。高盐浓度的上样缓冲液会产生更大片或扭曲的条带以及污点。 金属螯合剂，如 EDTA，可阻止样品中的核酸酶降解核酸。 染料 为监测样品的上样、电泳进展和 pH 值变化提供了颜色指示。部分上样缓冲液可能包含多个染料，以便有效跟踪样品中不同大小分子的迁移。 通常，上样染料都是带负电荷的小分子，因此迁移方向与核酸相同。其中有的显示pH值颜色，上样

琼脂糖凝胶电泳检测RNA质量

强度一般在0.02-0.2之间。 2）指示剂 电泳过程中，常使用一种由颜色的标记物以指示样品的迁移过程。核酸电泳常用的指示剂有两种：溴酚兰——成蓝紫色；二甲苯青——成蓝色。溴酚兰的分子量为670Da，在不同浓度凝胶中，迁移速度基本相同，它的分子筛效应小，近似于自由电泳，故普遍用作指示剂。二甲苯青的分子量为554.6Da，携带的电荷量比溴酚兰少，在凝胶中迁移率比溴酚兰慢，常用于聚丙烯酰胺凝胶电泳，也有溴酚兰和二甲苯青混合应用。指示剂一般加在上样缓冲液中，为了使样品能沉入胶孔，还要加入适量的蔗糖、聚蔗糖

植物总DNA的提取及琼脂糖凝胶电泳检测

或聚蔗糖400组成上样缓冲液。作用：①增加样品比重，以确保DNA均匀沉入加样孔内。②形成肉眼可见的指示带，预测核酸电泳的速度和位置。③使样品呈色，使加样操作更方便。 核酸染色剂：溴化乙锭（EB）：是一种荧光染料，EB分子可嵌入核酸双链的碱基对之间，在紫外线激发下，发出红色荧光。其荧光强度与DNA的含量成正比。据此可粗略估计样品DNA浓度。琼脂糖凝胶EB染色，肉眼可见核酸电泳带。注意事项：EB是致癌物质，切勿用手接触，更不要污染环境。 操作步骤： 1. 凝胶制备 制备0.8%琼脂糖凝胶。称取