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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 供应商:
杰美基因
- 规格:
100微升
供应试剂主要类别:细胞技术、分子技术、蛋白化学、免疫抗体、医学技术、生物化学、模式生物、微生物、植物、载体、毒理、营养、平台等等相关技术的各种大量试剂。
其中分子技术相关试剂类别如下:
DNA萃取试剂专题
胶回收或PCR产物纯化试剂专题
基因组DNA纯化试剂专题
法医学基因组DNA萃取试剂专题
DNA连接试剂专题
PCR反应试剂专题
RNA纯化试剂专题
RT-PCR试剂专题
RNA分析试剂专题
微型RNA(miRNA)试剂专题
核酸电泳试剂专题
报告基因检测试剂专题
甲基化分析试剂专题
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文献和实验,产生约15000种不同的mRNA分子.可见,由mRNA出发的cDNA克隆,其复杂程度要比直接从基因组克隆简单得多。 cDNA文库在研究具体某类特定细胞中基因组的表达状态及表达基因的功能鉴定方便具有特殊的优势,从而使它在个体发育、细胞分化、细胞周期调控、细胞衰老和死亡调控等生命现象的研究中具有更为广泛的应用价值,是研究工作中最常使用到的基因文库。 原理 经典cDNA文库构建的基本原理:用Oligo(dT)作逆转录引物,或者用随机引物,给所合成的cDNA 加上适当的连接
。 (5)未标记的dNTP 溶液:dGTP、dCTP 和dTTP 溶液,各5mmol/L。 [α-32 P] dATP:比活性>3000Ci/mmol, 10μCi/μl。 (7)缓冲液A:50mmol/L Tris?Cl (pH7.5); 50mmol/L NaCl; 5mmol/L EDTA (pH8.0); 0.5% SDS。 操作步骤: (1) 200ng 双链DNA(1μl)和7.5ng 随机引物(1μl)混合后置于eppendorf 管内,水浴煮沸5 分钟后,立即
得特异活性掺入,干燥后就可激发荧光,从而简化了图象获取过程。我们取得良好结果的其它荧光染料包括R110 (Perkin Elmer)、TAMRA (Perkin Elmer)和SpectrumOrange(Vysis)。 oligo-dT和随机引物逆转录标记:所有试剂应经过灭菌及DEPC处理。RNA溶于10µl水中,该溶液应包括一些对照RNA(参见本文后半部分)。加2.5µl(6µg)引物(20-mer oligo-dT,anchored oligo-dT,random hexamer
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