葡萄糖耗损法细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒

Ⅱ相代谢稳定性研究原理及实验方法

代谢产物或原型药物在酶的影响下与内源性小分子发生结合，使药物毒性、活性降低或极性增加而易于排出的反应。在药物的Ⅱ相代谢中，与葡萄糖醛酸的结合反应最为常见，由微粒体中的糖醛酸转移酶催化尿苷二磷酸葡萄糖醛酸（UDPGA）进行反应，形成葡萄糖苷酸，使其水溶性增加，易于排出体外。因此，在体外，如若加入肝微粒体和UGT系统，便可重建Ⅱ相代谢体系，从而进行Ⅱ相代谢稳定性研究。 3    肝微粒体体外温孵法实验方法描述 肝微粒体体外温孵法是由制备的肝微粒体辅以氧化还原型辅酶，由微粒体中的糖醛酸转移酶催化尿苷二磷酸葡萄糖

动物细胞培养方法

的效果。由于葡萄糖的价格相对低廉，这种方法很有前途。 3. 2　控制谷氨酰胺法 上面提到，没有葡萄糖，细胞可以利用谷氨酰胺作能量物质。因此，控制谷氨酰胺比控制葡萄糖要容易些，应用这一方法的报道也较多。控制谷氨酰胺浓度的目的，主要是减少氨的产生。氨对细胞的毒性比乳酸大得多，表现为降低比生长速率，增加死亡速率。有人详细地研究了动物细胞的代谢过程，采用底物限制补料分批工艺对动物细胞进行代谢控制。他采用这一方法, 使氨的浓度降低了一半。控制谷氨酰胺法与控制葡萄糖法一样，要维持葡萄糖在较低水平

体外微核试验原理及注意事项

。其他操作同多氯联苯诱导。S9 组分制成后，经无菌检查，测定蛋白含量 (Lowry 法)，每毫升蛋白含量不超过 40 mg 为宜，并经间接致突变剂鉴定其生物活性合格后贮存于- 80°C 低温或冰冻干燥，保存期不超过 1 年。1.2.3 S9 混合液的制备S9 混合液浓度一般为 1%～10%，实际使用浓度可由各实验室决定，但需对其活性进行鉴定，必须能明显活化阳性对照物，且对细胞无明显毒性。一般由 S9 组分和辅助因子按 1:9 组成 10% 的 S9 混合液，无菌现用现配。10%S9 混合液 10 mL