Ampholine(两性电解质)PH3.0-9.5

等电聚焦载体两性电解质

，这种合成方法与一般有机会合成不同，有机合成一般要求合成的产物愈纯愈好，而这里要求合成出的产物愈复杂愈好，要有多异构物和同系物，以保证的很多具有不同而又互相接近的pK值和pI值，从而得到平滑的pH梯度。载体两性电解质的等电点在pH3-10的范围，分子量在300-1000之间，它们的缓冲能力等于或优于组氨酸，电导性能良好，可以使电场强度分布较均匀，它们的水溶性良好，在1%水溶液中的紫外吸收值（260mμ）很低。      

聚丙烯酰胺凝胶平板等电聚焦电泳测定蛋白质等电点（图）

列的异构物和同系物，分子量在300～1000之间，各组分的等电点（pI）既有差异又相接近，pI的范围在2.5～11之间。R1和R2为氢或带有氨基的脂肪基。这一反应的特点是生成众多的异构物和同系物的混合物，而不是均一的化合物。混合物中各成分的含量、等电点的分布，取决于原材料的性质、比例和合成条件。目前常用的载体两性电解质的商品有：Ampholine（LKB公司）、Pharmlyte（Pharmacia公司）、Serralyty（Serva公司），近来已有国产商品了。不同厂家合成的方法不同，电泳的条件

等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点

0.5ml 0.01M KCl，用微电极测其pH。三、仪器和用具1.电泳仪2.垂直管式园盘电泳槽一套3.注射器与针头4.移液管：10ml、5ml、2ml、1ml、0.1ml5.小烧杯若干6.培养皿一套7.直尺8.小刀9.精密pH试纸和带细长复合pH电极的pH计10.塑料薄膜和橡皮筋四、试剂1.丙烯酰胺2.甲叉双丙烯酰胺3.两性电解质Ampholine（40%，pH3.5~9.5）4.过硫酸胺（催化剂）5.TEMED（四甲基乙二胺）（加速剂）6.磷酸7.NaOH8.三氯乙酸（TCA）五、溶液配制1.丙烯