
供应Eprogen 尺寸排阻色谱
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- 2025年07月11日
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Eprogen
供应Eprogen 尺寸排阻色谱
原理:利用分子筛对分子量大小的不同的各组分排阻能力的差异而完成分离,常用于高分子化合物,如组织提取物、多肽、蛋白质、核酸等,示意图如下:
Epeogen公司采用先进的填料合成技术,研制出针对蛋白、多肽、聚合物、复杂药物分离的尺寸排阻色谱,柱子规格如下:
内径:1-30 mm
长度:50-300 mm
颗粒大小:1.5-10 μm
孔径分布:50-4000 À
应用实例
复杂蛋白的快速分离
色谱柱: MICRO-Gold GPC 300,
7.8×300 mm I.D
检测条件:
流动相:0.1 M KH2PO4, pH=7
流速:1.0 mL/min
样品:
1 DNA
2 甲状腺球蛋白
3 β-淀粉酶
4 卵清蛋白
5 碳水化合物
6 甘氨酰-L-酪氨酸
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文献和实验尺寸排阻色谱仪不是根据组分与两相的相互作用的不同进行分离,而是根据组分分子体积(流体力学体积)或分子大小进行分离。尺寸排阻色谱仪简称排阻色谱仪,又称凝胶色谱仪或分子筛色谱仪,主要用于溶解度、极性、吸附或离子特征无足够差异的高分子化合物的分离和合成聚合物分子量分布的测定。 尺寸排阻色谱仪采用具有一定孔径分布的多孔性情性物质作为柱填料,柱填料与流动相平衡后,孔内充满流动相。当样品溶液随流动相流过色谱柱时,比填料最大孔径大的样品分子不能扩散进入填料孔内,完全被排阻在填料之外,随流动相最先流出
尺寸排阻色谱仪分析中使用的柱填料(固定相)一般为凝胶,除了要求热稳定性、机械强度和化学情性外,还应考虑排阻极限、分离范围、固定相流动相比和柱效,这些都与凝胶的孔径大小分布有关。 某些高交联聚苯乙烯胶、聚合胶、硅胶和多孔玻璃微球可以在高达50atm下使用。这些填料比起软胶来说具有某些优点:填充比较容易,不需要放在洗脱液中作预先溶胀,且能获得机械性能稳定的柱子(即渗透率与外加压力无关)。因为填料不需要进行充分溶胀,可以使用多种洗脱液。又因溶胀度不变,能够方便地更换洗脱液。这些填料和其孔结构
分子排阻色谱法是根据分子大小进行分离的一种液相色谱技术。分子排阻色谱法的分离原理为凝胶色谱柱的分子筛机制。色谱柱多以亲水硅胶、凝胶或经修饰凝胶如葡聚糖凝胶Sephadex和聚丙烯酰胺凝胶Sepherose等为填充剂,这些填充剂表面分布着不同尺寸的孔径,药物分子进入色谱柱后,它们中的不同组分按其大小进入相应的孔径内,大小大于所有孔径的分子不能进入填充剂颗粒内部,在色谱过程中不被保留,最早被流动相洗脱至柱外,表现为保留时间较短;大小小于所有孔径的分子能自由进入填充剂表面的所有孔径
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