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- 保存条件:
室温
- 保质期:
三年
- 英文名:
Decarborxylase Medium Base
- 库存:
1000
- 供应商:
广东环凯微生物科技有限公司
- 规格:
250g
022090 氨基酸脱羧酶试验基础培养基
(Decarborxylase Medium Base)
用 途:
氨基酸脱羧酶试验基础培养基供鉴别肠道菌属能否产生氨基酸脱羧酶用(GB/T4789.4-2008和《中华人民共和国药典》2005年版)。
原 理:
蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖为可发酵糖类;溴甲酚紫为pH指示剂,酸性呈黄色,碱性呈紫色;在基础培养基加入赖氨酸、精氨酸和鸟氨酸检测细菌是否产生以上底物的酶。
[氨基酸脱羧酶试验基础培养基配方(每升)]:
蛋白胨5g
酵母膏粉3g
葡萄糖1g
溴甲酚紫0.016g
最终pH 6.8±0.2
[氨基酸脱羧酶试验基础培养基使用方法]:
1、 称取本品9g,加入蒸馏水或去离子水或去离子水1 L,分别加入5g L-氨基酸或10g DL-氨基酸(赖氨酸、精氨酸或鸟氨酸),搅拌加热煮沸至完全溶解后再校正pH。对照培养基不加氨基酸。分装试管,每管2.5mL,液面复盖约3mm高度液体石蜡。
2、 115℃高压灭菌10min,待冷却后备用。
3、 取待检菌的新鲜纯培养物,分别接种在含有各种氨基酸的培养基内(仔细地通过培养基内的液体石腊层接种在培养基内)和不含氨基酸的对照管内,置36±1℃培养18—24h后作初次观察,必要时可延长至48h。
4、 氨基酸脱羧酶阳性者由于产碱,培养基呈紫色。阴性者无碱性产物,但因葡萄糖产酸而使培养基变为黄色。对照管应为黄色。
质量控制:
下列菌株接种后36±1℃培养18—24h,结果如下:
| 菌 名 | 菌 号 | 生长状况 | 培养特征 |
| 鼠伤寒沙门氏菌 | CMCC(B)50115 | 良好 | 培养基呈紫色 |
| 普通变形杆菌 | CMCC(B)49027 | 良好 | 培养基呈黄色 |
注意事项:
1、 接种前须将各种培养基及对照管做好标记,以免混淆,造成错误判断。
2、 经培养后对照管必须为黄色,否则氨基酸脱羧酶试验无效。
3、 判断结果时,应与未接种的培养基进行比较,试验管出现任何紫色的痕迹都可判定为阳性结果,培养时间一般不应超过4d,若时间过长,蛋白胨中其他氨基酸可被分解产碱,出现假阳性。
4、 有时培养时间过长指示剂被破坏,颜色可能不清楚或消失,可在试管内再加溴甲酚紫来证实。
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:100g
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文献和实验,上面滴加一层液体石蜡,115℃高压灭菌10min. 试验方法 从琼脂斜面上挑取培养物接种,于36±1℃培养18~24h,观察结果。氨基酸脱羧酶阳性者由于产碱,培养基应呈紫色。阴性者无碱性产物,但因葡萄糖产酸而使培养基变为黄色。对照管应为黄色。
氨基酸脱羧酶试验的概述是检验主管技师考试辅导的部分内容,以下是医学教育网对这块内容的整理,希望对考生有所帮助: (1)培养基:氨基酸脱羧酶培养基和氨基酸对照培养基。 (2)方法:将被检菌分别接种于赖氨酸(或鸟氨酸或精氨酸)培养基和氨基酸对照培养基中,并加入无菌液体石蜡或矿物油,于35℃培养l~4d,每日观察结果。 (3)结果:对照管应呈黄色,测定管呈紫色(指示剂为溴甲酚紫)为阳性,若测定管呈黄色为阴性。若对照管呈现紫色则试验无意义,不能作出判断。
成份: L-氨基酸 0.5克 蛋白胨 0.5克 牛肉膏 0.5克 葡萄糖 0.05克 吡多醛 0.5克 水 100毫升 2%溴甲酚紫乙醇液 0.5毫升 2%甲酚红 0.25毫升 制法:除指示剂及氨基酸外,溶解,PH6.0,然后加入氨基酸(必要时重新调PH)及指示剂,混匀分装1毫升/管加10毫米厚石蜡油,高压10--15磅10--15分钟灭菌备用. 注意: 1 使用DL型AA时量加倍. 2 最好同时接种空白管(即不含
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