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常温,避光
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6个月
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大量
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上海信裕
中文名:小鼠脏器组织白细胞分离液试剂盒
产品规格:200ml/KIT
用途:本产品仅供实验室药品检测用,不作其他用途。
购买我公司的标准品大鼠细胞分离液我们将免费为您提供全程技术指导,解决您的后顾之忧。
小鼠脏器组织白细胞分离液试剂盒用途:
用于体外分离人外周淋巴血细胞,也可以从其他来源中分离单核细胞,包括脐带血细胞和骨髓细胞。
分离方法:
分离混合血液白细胞早期的方法,总是伴随红细胞聚集,只轻微影响白细胞。通过离心,红细胞密度增加聚集,同时可以从离心管上部收集白细胞。
Böyum提出了一种更方便,通过使用Ficoll® 甲泛影钠溶液离心快速分离方法。稀释的血液在Ficoll甲泛影钠溶液中分层,低速短时离心。红细胞和沉降到管底的粒细胞,和单个核细胞(淋巴细胞)和血小板可以从两个分层之间收集。
许多研究者不断努力,修订了Böyum方法,MP生物医学公司生产的LSM,方法的独特之处是运用,泛影钠成功的代替了甲泛影钠。
小鼠脏器组织白细胞分离液试剂盒分离原理:
除去血液中的纤维蛋白或肝素处理血液以1:1的比例用生理盐水或平衡盐溶液稀释,在分离溶液中分层,低速离心30分钟。通过离心,迁移能力不同最终形成不同的细胞层。
大部分的红细胞和粒细胞通过梯度迁移形成颗粒状。由于其密度不同,淋巴细胞和其他单个核细胞(单核细胞和血小板)分布在在血浆和LSM两层中间。淋巴细胞可以通过回抽分层回收,在进一步去除血小板,LSM和血浆。
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文献和实验开来。 2 方法 1) 无菌条件下抽取骨髓于含抗凝剂的采血管内,将骨髓与生理盐水或PBS溶液按等比例混匀,备用。 2) 按照稀释骨髓:细胞分离液比例为3:2的比例,缓慢将稀释骨髓液加入到细胞分离液上层,需保持液面分界清晰。 3) 800g,室温,离心 20min-30min(注:设置较慢的加速度和减速度,如果有十档,设为第三档)。 4) 小心吸取骨髓单个核细胞层(即白膜层)并转移至15mL离心管中。离心结束后,管内液面从上至下依次为无细胞骨髓液层、骨髓单个核细胞层、分离液层和红细胞
标记方式小鼠的细胞正选是采用间接标记的方式。先将小鼠的细胞与PE标记的抗靶细胞的特异性抗体结合,再采用StemCell公司的专利TAC技术将PE标记的细胞与EasySep®免疫磁珠相连。在EasySep®专用磁极提供的磁场中,即可使靶细胞与非靶细胞分离。您可以使用我们提供的完整的试剂盒分选小鼠的细胞,也可以选择EasySep® PE、FITC或生物素分选系统与自己的PE、FITC或生物素—偶联的单抗相结合,来富集任何所需的细胞。用于负选小鼠的细胞标记方式EasySep®小鼠的细胞负选也是采用间接
分别利用 CD3 与 CD28 的功能学抗体,以及 CD3/CD28 Streptamer® 激活扩增 T 细胞的实验步骤与实验结果。 CD3/CD28抗体法 1、实验步骤: 1.1 抗体包被 用无菌 PBS 将 anti-mouse CD3 抗体(克隆号:145-2C11)稀释至 5μg/ml,稀释后的抗体加入到 24 孔板中,每孔 400μl,4°C 包被过夜。(注:板子在加入抗体之前,先用无菌 PBS 润洗 2-3 遍,避免干孔); 1.2 小鼠脾脏淋巴细胞分离(次日) 1. 将 70μm
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