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克隆宿主菌DH5α

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  • 美国
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  • 2025年07月14日
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    • 英文名

      北诺

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      北诺

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    PET32a-DsRed2
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    pEGFP-N1
    PLPP-STII
    PLLP-OmpA
    PTrc-CKS
    Pmal-c2x
    Pmal-p5x
    PMBP-C
    PMBP-P
    PUC19
    PET28a-sumo
    PET-duet
    pACYCDuet-1
    pRSFDUET-1
    pproexhta
    pproexhtB
    PcoldI
    PcoldI-sumo
    PBV220
    求交换各种人源基因

    PEGFP-N1
    PGL-4.15
    PRL-TK
    PRL-SV40
    PCDNA3.1+/(-)

    大肠菌株DH5α
    大肠菌株JM109
    大肠菌株DH10B
    大肠菌株BL21(DE3)
    pBV220
    pET26b
    pET30a
    pET5b
    Rosetta-gami-B(DE3)

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    • 【建议】本月讨论与整理专帖-T-A克隆,另开帖不加分!

      本月旧帖整理活动专题: T-A克隆技术 大家可以在以下基础上进行整理或对具体问题进行讨论 (1)如何筛选合适的宿主菌株 ◇ 所选的宿主菌株应对所用质粒的抗生素抗性基因敏感。 ◇ 如进行蓝/白斑筛选,宿主菌β-半乳糖苷酶的α-肽编码区应在染色体或附加体上缺失掉(lacZΔΜ15)。TOP10和DH5α都能用于蓝/白斑筛选。 ◇ 要表达重组蛋白,可使用带有可诱导的T7 RNA聚合酶基因的菌株,如BL21(DE3)。 ◇ 使用pGEM载体克隆大片段时(>7-8 kb),经转化

    • 如何阅读质粒图谱

      相关,不同的载体是不一样的。一个载体可只看它的启动子到终止子那一段,其它的可以考虑少些。 pET 表达菌株的相关信息 ( DE3 )指宿主为 λ DE3 溶原菌,其染色体上带有一拷贝由 lacUV5 启动子控制的 T7 RNA 聚合酶基因。这类菌株适用于从克隆到 pET 载体的目标基因生产蛋白。命名为 pLysS 和 pLysE 的宿主菌带有编码 T7 溶菌酶(为 T7 RNA 聚合酶的天然抑制物)的 pET 相容性质粒。带有 pLysS 的细胞

    • 植物基因在大肠杆菌中的原核表达

      。 1.准备工作(试剂配置和器材准备) 1)操作流程示意图 主要步骤操作 ①制备pET-32a(+)载体 用限制性酶消化,去磷酸化后胶纯化回收 ②制备插入DNA PCR装入质粒后进行限制性消化,再回收 ③插入片段克隆到pET-32a(+)载体 插入片段与pET连接,转化 ④转化表达宿主菌BL21 转化带有T7RNA聚合酶基因的菌株 ⑤诱导表达目的蛋白 SDS-PAGE,Western 印迹、定量分析确定目的蛋白 ⑥放大试验纯化目的

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