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Ficoll密度梯度离心法提取PBMC原理及注意事项

Ficoll密度梯度离心法提取PBMC原理及注意事项 外周血单个核细胞（Peripheral Blood Mononuclear Cell，PBMC），是指外周血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞（Lymphocyte）、单核细胞（Monocyte）、树突状细胞（DC）和其他少量细胞。PBMC 可利用健康人或动物供体的外周血，通过 Ficoll 密度梯度离心，磁珠分选等步骤获得，主要包括淋巴细胞和单核细胞。 Ficoll 是蔗糖的多聚体，中性，平均分子量 400,000，当密度为 1.2

rⅡ基因座位 rⅡlocus

组的 1.4％，包含相互连接的两个顺反子 rⅡ A、 rⅡ B，分别由 1,800± 70， 850± 50碱基对构成。在引起突变时，除上述的表现型外，也可以了解到如下的现象：感染菌的脂质代谢，细胞膜通透性的变化， T4 噬菌体对 DNA连接酶基因突变的抑制作用等，可以认为这种基因的机能与感染噬菌体后寄主细胞膜的合成有关。这种 rⅡ变异株与 rⅠ、 rⅢ变异株一样，达至溶菌的时间很快，因此名称冠以 rapid lysis的首字。  

Ficoll密度梯度离心法

　　测定细胞免疫功能首先要从人或动物外周血或组织中获取有活性的细胞，如淋巴细胞、巨噬细胞、粒细胞等。取得有活性的细胞应根据不同目的，采用不同方法，考虑：(1)细胞纯度；(2)细胞获得量；(3)细胞活力；(4)使用方法的简易程度和本室条件等。目前常用Ficoll密度梯度离心法直接分离和纯化外周血单个核细胞。 　　(一)　原理: 　　常用来分离人外周血单个核细胞（PBMC）的分层