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2-10℃
- 英文名:
Lipopolysaccharide, from E.coli O157 (by ultracentrifugation)
- 规格:
5 mg
for Cellbiology
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文献和实验,可使绝大多数大肠杆菌的菌体裂解。此方法作用比较温和。在提取核酸时,常用此法破碎细胞。三、蛋白质的提纯蛋白质纯化方法属于生物化学技术,本章只作较简要介绍。1、超速离心法此法分离和纯化抗原的原理是利用各颗粒在梯度液中沉降速度的不同,使具有不同沉降速度的颗粒处于不同密度梯度层内,达到彼此分离的目的。常用的密度梯度介质有蔗糖、甘油、CsCl等。用超速离心或梯度密度离心分离和纯化抗原时,除个别成分外,极难将某一抗原成分分离出来,故只用于少数大分子抗原的分离,如IgM、C1q,甲状腺球蛋白等,以及一些比重较轻
DNA 分子量小,在酸性环境中(低pH),双链解旋,但不拆开,当pH恢复中性时,恢复成环状。由于分子量小,所以离心沉淀时,不下沉,保留在上清溶液中。缺点: pH 值太低会降解DNA, pH 的适度难以掌握,稍一偏差,全部DNA 被降解,什么也没抽到。现不常用。3、溴化乙锭-氯化铯(CsCl)梯度离心法:1)不同的氯化铯浓度和不同的离心时间会成为不同的密度梯度。2)抽提破细胞后,蛋白质,染色体DNA,质粒DNA,RNA 全部释放出来,加入溴化乙锭(EB),通过EB对不同物质的插入多少而形成不同的密度
确定了核酸是遗传的物质基础,为认识核酸与蛋白质的关系及其生命中的作用打下了最重要的基础。在些期间的主要进展包括: 遗传信息传递中心法则的建立。 在发现DNA双螺旋结构同时,Watson和Crick就提出DNA复制 的可能模型。其后在1956年A.Kornbery首先发现DNA聚合酶 ;1958年Meselson及Stahl同位素标记和超速离心分离实验为DNA半保留模型提出了证明;1968年Okazaki(冈畸)提出DNA不连续复制模型;1972年证实了DNA复制
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