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- 2025年07月14日
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大量
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上海沪震
基础明胶蛋白胨
绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上，添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物，其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸，维生素的范围亦很广，另外常规含有无机盐和代谢添加剂（例如核苷酸）。MEM/F12 这两种培养基各取1/2，形成神经生物学最通用的培养基。Dulbecco`s改良培养基——DMEM，现应用于快速生长的细胞，同MEM含有相同的营养成分，但浓度高出2~4倍。选择某种培养基，应仔细了解成分表，应知道大多数情形下培养基都有不足。例如，有些培养基在氨基酸中包括有谷氨酸，而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域，但它对某些对谷氨酸敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言，则并非最佳选择，特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。F12中含有硫酸亚铁，据报道也有神经毒效应。
明胶蛋白胨 制备方法：
1. 培养同源细胞（未克隆前时的同一细胞）至半汇合状态时，更换一次培养液，再继续培养24~48小时后，吸出所有培养液。
2. 离心：3000~4000/分离心10分钟，吸取上清液。
3. 滤过：再经直径0.22μm滤孔的滤膜过滤，低温冻存贮备用；用时取1分适应培养基+2培养基混合使用。
生长因子绝大多数哺乳类胚胎神经元有严格的营养要求，若不能提供适宜的生长因子或合适的因子组分，将会使绝大多数神经元在体外培养的数天中死亡。解决这一问题有两条思路，一是让培养细胞提供自己的营养因子，二是在明胶蛋白胨 中加入纯的生长因子。如果细胞混合物能在高密度时生长，所需的生长因子便会积累到可观的数值，尤其当培养基很少变化时。若某种细胞混合物生长时有很少的营养需求，可保持培养基在一段时间里不作任何变动，以使营养（生长）因子积累，而最后促使所需要的细胞类型能够生长。但是，这种对营养（生长）因子自身倚赖性亦有弊端，因为通常在混合细胞群体中细胞很难有同比例增殖，某些细胞会因生长条件的贫乏而受限制。另外，这种方法只能进行相当高密度的细胞培养。因为培养基的条件在细胞的较低密度时变的不够有效。不过某些时候纯化神经元群体的低密度培养可用条件培养基（经过了高密度培养）进行，或在胶质上生长的神经元所用过的培养基来支持。
满足神经元营养需求的第二条途径是向培养基中加入生长因子。通常用于组培的通用适宜因子是神经生长因子NGF。不过，只有少数对这种蛋白质有反应的细胞类型的细胞才能生长。
明胶蛋白胨 注意事项
1 用L-多聚赖氨酸（0.1mg/ml） 包被培养板后，要待其干后才能接种，因为其对神经元有毒性。L-多聚赖氨酸（0.1mg/ml）能回收再利用。
2 取脑组织时动作尽量要快，并且尽量低温操作。
3 分离皮层和海马时，要尽量分离脑膜和血管，否则有大量的成纤维细胞。
4 用吸管轻轻吹打细胞时，尽量不起泡沫，以免损伤神经元。
5 接种细胞的过程，动作要快，以免细胞聚集。
6 接种细胞后，24h勿移动，以免影响细胞贴壁。
明胶蛋白胨 相关产品如下：
hz1118 甘露醇高盐琼脂 250g 用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养
Manitol Salt Agar
hz1396 酪胨琼脂 250g 用于药品，生物制品无菌试验
Peptone from Casein Agar
hz1397 葡萄糖蛋白胨培养基 250g 用于药品，生物制品无菌试验
Dextrose Peptone Medium
hz1398 卵黄高盐琼脂基础 250g 用于药品、生物制品金黄色葡萄球菌选择性分离
Egg-Yolk Salt Agar Base
hz1399 MUG培养基 100g 用于大肠杆菌测定
MUG Medium
hz1400 真菌琼脂培养基 250g 用于无菌生长试验
Fungi Agar Medium
hz1402 磷酸盐葡萄糖胨水培养基 Phosphate Glucose Peptone Water Medium 250g 用于甲基红试验
hz1403 胰蛋白胨水培养基 250g 用于靛基质试验
Peptone Water Medium
hz1405 硝酸盐胨水培养基 250g 用于硝酸盐还原产气试验
Nitrate Saline Peptone Water Medium
hz1406 改良马丁液体培养基 250g 用于菌苗制造及生物制品霉菌无菌检验
Martin Broth ，Modified
hz1408 改良马丁琼脂培养基 250g 用于生物制品霉菌无菌检验
Martin Agar Medium ，Modified
饮用水及水源检测培养基
hz1001 平板计数琼脂 250g 用于饮用天然矿泉水中细菌总数的检验
Plate Count?Agar
hz1036 乳糖胆盐发酵培养基 250g 用于饮用天然矿泉水中大肠杆菌的检验（GB标准）
Lactose Bile Broth
hz1039 乳糖蛋白胨培养液 250g 用于饮用水，水源水中总大肠菌群的测定
Lactose Peptone Broth
hz1042 亮绿琼脂 250g 用于饮用水，水源水中沙门氏菌选择性增菌
Brilliant Green Lactose Broth
hz1043 亮绿乳糖培养基 Brilliant Green Lactose Medium 250g 用于饮用天然矿泉水中大肠杆菌的检验（GB标准）
hz1083 亚硫酸铋琼脂 250g 用于饮用水，水源水中沙门氏菌的选择性培养
Bismuth Sulfite Agar
hz1044 品红亚硫酸钠琼脂（远滕氏琼脂） 250g 用于饮用水、水源水中总大肠菌群的选择性分离和确证
Fuchsin Basic Sodium Sulfite Agar
hz1410 假单胞分离琼脂 250g 用于饮用水，水源水中假单胞菌群的测定
Pseudomonas Isolation Agar
hz1401 假单胞分离肉汤 250g 用于饮用水，水源水中假单胞菌群的测定
Pseudomonas Isolation?Broth
hz1402 假单胞 F 琼脂 250g 用于饮用水，水源水中铜绿假单胞菌的测定
Pseudomonas F Agar
hz1403 假单胞 P 琼脂 250g 用于饮用水，水源水中铜绿假单胞菌的测定
Pseudomonas P Agar
hz1406 MFC培养基 250g 用于饮用水、水源水中粪大肠菌群滤膜法测定（GB标准）
MFC Medium
hz1407 气单胞菌鉴别琼脂 250g 用于分离培养和鉴别气单胞菌
Aeromonas Differential Agar
hz1028 橙血清培养基 Orange-serum agar 250g 用于食品及饮料中耐酸菌的检测
罐头食品商业无菌检测培养基
hz1011 溴甲酚紫葡萄糖肉汤 250g 用于低酸性罐头食品商业无菌检验
Bromcresol Purple Dextrose Broth
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1. 培养同源细胞（未克隆前时的同一细胞）至半汇合状态时，更换一次培养液，再继续培养24~48小时后，吸出所有培养液。
2. 离心：3000~4000/分离心10分钟，吸取上清液。
3. 滤过：再经直径0.22μm滤孔的滤膜过滤，低温冻存贮备用；用时取1分适应培养基+2培养基混合使用。
生长因子绝大多数哺乳类胚胎神经元有严格的营养要求，若不能提供适宜的生长因子或合适的因子组分，将会使绝大多数神经元在体外培养的数天中死亡。解决这一问题有两条思路，一是让培养细胞提供自己的营养因子，二是在明胶蛋白胨 中加入纯的生长因子。如果细胞混合物能在高密度时生长，所需的生长因子便会积累到可观的数值，尤其当培养基很少变化时。若某种细胞混合物生长时有很少的营养需求，可保持培养基在一段时间里不作任何变动，以使营养（生长）因子积累，而最后促使所需要的细胞类型能够生长。但是，这种对营养（生长）因子自身倚赖性亦有弊端，因为通常在混合细胞群体中细胞很难有同比例增殖，某些细胞会因生长条件的贫乏而受限制。另外，这种方法只能进行相当高密度的细胞培养。因为培养基的条件在细胞的较低密度时变的不够有效。不过某些时候纯化神经元群体的低密度培养可用条件培养基（经过了高密度培养）进行，或在胶质上生长的神经元所用过的培养基来支持。
满足神经元营养需求的第二条途径是向培养基中加入生长因子。通常用于组培的通用适宜因子是神经生长因子NGF。不过，只有少数对这种蛋白质有反应的细胞类型的细胞才能生长。
明胶蛋白胨 注意事项
1 用L-多聚赖氨酸（0.1mg/ml） 包被培养板后，要待其干后才能接种，因为其对神经元有毒性。L-多聚赖氨酸（0.1mg/ml）能回收再利用。
2 取脑组织时动作尽量要快，并且尽量低温操作。
3 分离皮层和海马时，要尽量分离脑膜和血管，否则有大量的成纤维细胞。
4 用吸管轻轻吹打细胞时，尽量不起泡沫，以免损伤神经元。
5 接种细胞的过程，动作要快，以免细胞聚集。
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