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- 2025年07月05日
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绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上，添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物，其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸，维生素的范围亦很广，另外常规含有无机盐和代谢添加剂（例如核苷酸）。MEM/F12 这两种培养基各取1/2，形成神经生物学最通用的培养基。Dulbecco`s改良培养基——DMEM，现应用于快速生长的细胞，同MEM含有相同的营养成分，但浓度高出2~4倍。选择某种培养基，应仔细了解成分表，应知道大多数情形下培养基都有不足。例如，有些培养基在氨基酸中包括有谷氨酸，而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域，但它对某些对谷氨酸敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言，则并非最佳选择，特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。F12中含有硫酸亚铁，据报道也有神经毒效应。
松三糖发酵管 制备方法：
1. 培养同源细胞（未克隆前时的同一细胞）至半汇合状态时，更换一次培养液，再继续培养24~48小时后，吸出所有培养液。
2. 离心：3000~4000/分离心10分钟，吸取上清液。
3. 滤过：再经直径0.22μm滤孔的滤膜过滤，低温冻存贮备用；用时取1分适应培养基+2培养基混合使用。
生长因子绝大多数哺乳类胚胎神经元有严格的营养要求，若不能提供适宜的生长因子或合适的因子组分，将会使绝大多数神经元在体外培养的数天中死亡。解决这一问题有两条思路，一是让培养细胞提供自己的营养因子，二是在松三糖发酵管 中加入纯的生长因子。如果细胞混合物能在高密度时生长，所需的生长因子便会积累到可观的数值，尤其当培养基很少变化时。若某种细胞混合物生长时有很少的营养需求，可保持培养基在一段时间里不作任何变动，以使营养（生长）因子积累，而最后促使所需要的细胞类型能够生长。但是，这种对营养（生长）因子自身倚赖性亦有弊端，因为通常在混合细胞群体中细胞很难有同比例增殖，某些细胞会因生长条件的贫乏而受限制。另外，这种方法只能进行相当高密度的细胞培养。因为培养基的条件在细胞的较低密度时变的不够有效。不过某些时候纯化神经元群体的低密度培养可用条件培养基（经过了高密度培养）进行，或在胶质上生长的神经元所用过的培养基来支持。
满足神经元营养需求的第二条途径是向培养基中加入生长因子。通常用于组培的通用适宜因子是神经生长因子NGF。不过，只有少数对这种蛋白质有反应的细胞类型的细胞才能生长。
松三糖发酵管 注意事项
1 用L-多聚赖氨酸（0.1mg/ml） 包被培养板后，要待其干后才能接种，因为其对神经元有毒性。L-多聚赖氨酸（0.1mg/ml）能回收再利用。
2 取脑组织时动作尽量要快，并且尽量低温操作。
3 分离皮层和海马时，要尽量分离脑膜和血管，否则有大量的成纤维细胞。
4 用吸管轻轻吹打细胞时，尽量不起泡沫，以免损伤神经元。
5 接种细胞的过程，动作要快，以免细胞聚集。
6 接种细胞后，24h勿移动，以免影响细胞贴壁。
松三糖发酵管 相关产品如下：
hz2619 玉米粉琼脂 250ml 用于真菌培养
hz2620 孟加拉红培养基 250ml 用于食品中霉菌及酵母菌总数测定
hz2621 缓冲蛋白胨水（BPW） 250ml 用于沙门氏菌前增菌培养，亦可用于李氏菌前增菌培养（GB、SN标准）
hz2622 盐胱氨酸增菌液（SC） 250ml 用于沙门氏菌选择性增菌培养（GB、SN标准）
hz2623 四硫磺酸盐煌绿增菌液基础（TTB） 250ml 用于沙门氏菌选择性增菌培养，需加入煌绿和碘液（GB、SN标准）
hz2624 胆硫乳琼脂（DHL） 250ml 肠道菌选择性培养基，特别是沙门氏菌的选择性分离（GB、SN标准）
hz2625 三糖铁琼脂（TSI） 250ml 生化培养基，用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选（GB、SN标准）
hz2626 SS琼脂 250ml 用于沙门氏菌，志贺氏菌的选择性分离培养（GB标准）
hz2627 改良番茄汁培养基 250ml 用于食品中乳酸菌总数测定
hz2628 改良MC培养基 250ml 用于食品中乳酸菌总数测定
hz2629 MRS琼脂基础 250ml 用于食品中乳酸菌总数测定
hz2630 Lhz琼脂 250ml 用于乳酸菌检测和分离培养
hz2631 胰蛋白胨水培养基 250ml 用于靛基质试验
hz2632 葡萄糖蛋白胨培养基 250ml 用于药品，生物制品无菌试验
hz2633 玫瑰红钠琼脂 250ml 用于霉菌、酵母菌计数
hz2634 0.5%葡萄糖肉汤培养基 250ml 药品细菌培养，滴眼剂金黄色葡萄球菌培养等
hz2635 肉汤琼脂培养基 250ml 药品卫生检验，细菌数测定，无菌试验
hz2637 改良马丁琼脂培养基 250ml 用于生物制品霉菌无菌检验
hz2638 SCDLP液体培养基 250ml 用于化妆品样品制备，前增菌培养（GB标准）
hz2639 卵磷脂吐温80营养琼脂 250ml 用于化妆品细菌总数测定（GB标准）
hz2640 乙酰胺琼脂 250ml 用于绿脓杆菌的选择性分离培养（GB标准）
hz2641 十六烷三甲基溴化铵琼脂 250ml 用于绿脓杆菌的选择性分离培养（GB标准）
hz2642 甘露醇发酵培养基 350ml 用于细菌甘露醇发酵试验（GB标准）
一次性培养基平板 单位：元
货号 产品名称 规格 产品说明与用途
hz2001 平板计数琼脂平板（9cm） 10个/包 国际标准平板计数琼脂，含糖，用于细菌总数的测定
Plate Count Agar
hz2002 营养琼脂平板（9cm） 10个/包 细菌计数、不含糖，可作血琼脂基础和传代用
Nutrient Agar
hz2003 血平皿（9cm） 10个/包 用于一般细菌的分离、培养和溶血试验
Blood Agar Plates
hz2004 哥伦比亚血琼脂平板（9cm） 10个/包 用于营养要求高细菌的分离、培养和溶血试验
Columbia Blood Agar
hz2005 巧克力琼脂平板（9cm） 10个/包 用于嗜血杆菌、奈瑟氏菌分离培养
Chocolate Agar
hz2006 NA平板（加青霉素酶）（9cm） 10个/包 细菌计数、不含糖，可作血琼脂基础和传代用
Nutrient Agar
hz2007 伊红美蓝琼脂平板（9cm） 10个/包 弱选择性培养基、用于分离肠道致病菌，特别是大肠杆菌
Eosin-Methylene Blue Agar
hz2008 SS琼脂平板（9cm） 10个/包 用于沙门氏菌，志贺氏菌的选择性分离培养
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文献和实验法 图2 细菌纯培养划线方法 (二) 钓菌和纯培养：观察菌落，选单个菌落，标记后，钓取目的菌落，如图2之一方法接种于普通琼脂斜面上，37℃培养24h。 （三）生化实验 1、糖发酵实验：原理。将糖发酵管甩至两端，标记后折断，每组将1.2菌接种于两套糖发酵管中，倒立37℃培养24h。 2、靛基质实验：原理。每组将2、3号菌接入蛋白胨水培养基中，37℃培养4天后，加入靛基质 试剂 ，观察结果，
，乳糖发酵管等。 (三)实验方法1．将伤寒杆菌，大肠杆菌按照液体接种方法分别接种于葡萄糖及乳糖发酵管内。 2．置37℃孵箱培养18~24小时。 3．观察结果：由于一些细菌能分解某种糖类产酸，所以培养基中PH下降到7.0以下，在酚红指示剂的显示下，培养基颜色由红变黄。产酸者以“+”表示，如果同时产生气体，则培养基中小倒管内有气泡出现，此乃产酸又产气，以“⊕”表示，不分解，则指示剂不变色，用“-”表示。 (四)、实验结果 伤寒杆菌 大肠杆菌 葡萄糖 + ⊕ 乳 糖 - ⊕ 二、V-P(Voges
一、单糖发酵试验(一)、实验原理单糖发酵是将葡萄糖，乳糖或麦芽糖等分别加入蛋白胨水培养基内，使其最终浓度为 0.75~1％。并加入一定量酚红指示剂及小倒管，制成单糖发酵管，接种细菌经37℃培养18~24小时，若能分解糖产酸则酚红指示剂由红变黄，若能分解 甲酸有CO2和H2等气体形成，小倒管内则聚集有气泡；不分解，则指示剂不变色。(二)、实验材料1．菌种：大肠杆菌，伤寒杆菌18~24小时琼脂斜面培养物。2．培养基：葡萄糖发酵管，乳糖发酵管等。(三)实验方法1．将伤寒杆菌，大肠杆菌按照液体接种
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