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常温,避光
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6个月
- 英文名:
White Medium
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大量
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上海沪震
绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和代谢添加剂(例如核苷酸)。MEM/F12 这两种培养基各取1/2,形成神经生物学最通用的培养基。Dulbecco`s改良培养基——DMEM,现应用于快速生长的细胞,同MEM含有相同的营养成分,但浓度高出2~4倍。选择某种培养基,应仔细了解成分表,应知道大多数情形下培养基都有不足。例如,有些培养基在氨基酸中包括有谷氨酸,而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域,但它对某些对谷氨酸敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言,则并非最佳选择,特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。F12中含有硫酸亚铁,据报道也有神经毒效应。
White 培养基 制备方法:
1. 培养同源细胞(未克隆前时的同一细胞)至半汇合状态时,更换一次培养液,再继续培养24~48小时后,吸出所有培养液。
2. 离心:3000~4000/分离心10分钟,吸取上清液。
3. 滤过:再经直径0.22μm滤孔的滤膜过滤,低温冻存贮备用;用时取1分适应培养基+2培养基混合使用。
生长因子绝大多数哺乳类胚胎神经元有严格的营养要求,若不能提供适宜的生长因子或合适的因子组分,将会使绝大多数神经元在体外培养的数天中死亡。解决这一问题有两条思路,一是让培养细胞提供自己的营养因子,二是在White 培养基 中加入纯的生长因子。如果细胞混合物能在高密度时生长,所需的生长因子便会积累到可观的数值,尤其当培养基很少变化时。若某种细胞混合物生长时有很少的营养需求,可保持培养基在一段时间里不作任何变动,以使营养(生长)因子积累,而最后促使所需要的细胞类型能够生长。但是,这种对营养(生长)因子自身倚赖性亦有弊端,因为通常在混合细胞群体中细胞很难有同比例增殖,某些细胞会因生长条件的贫乏而受限制。另外,这种方法只能进行相当高密度的细胞培养。因为培养基的条件在细胞的较低密度时变的不够有效。不过某些时候纯化神经元群体的低密度培养可用条件培养基(经过了高密度培养)进行,或在胶质上生长的神经元所用过的培养基来支持。
满足神经元营养需求的第二条途径是向培养基中加入生长因子。通常用于组培的通用适宜因子是神经生长因子NGF。不过,只有少数对这种蛋白质有反应的细胞类型的细胞才能生长。
White 培养基 注意事项
1 用L-多聚赖氨酸(0.1mg/ml) 包被培养板后,要待其干后才能接种,因为其对神经元有毒性。L-多聚赖氨酸(0.1mg/ml)能回收再利用。
2 取脑组织时动作尽量要快,并且尽量低温操作。
3 分离皮层和海马时,要尽量分离脑膜和血管,否则有大量的成纤维细胞。
4 用吸管轻轻吹打细胞时,尽量不起泡沫,以免损伤神经元。
5 接种细胞的过程,动作要快,以免细胞聚集。
6 接种细胞后,24h勿移动,以免影响细胞贴壁。
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文献和实验有翅亚纲的 1目。中小型的社会性昆虫。腹部柔软,触角念珠状,翅膜质狭长,两对翅相似,尾须一对。通称白蚁或螱。在昆虫中,它们属于比较原始的类型。进化系统上与暃蠊近缘。生活习性与蚂蚁相似,属于社会性昆虫。白蚁与蚂蚁虽一般同称为蚁。但在分类地位上,白蚁属于较低级的半变态昆虫,蚂蚁则属于较高级的全变态昆虫。根据化石判断,白蚁可能是由古直翅目昆虫发展而来。最早出现于 2亿年前的二叠纪。白蚁的形态特征与蚂蚁有明显的不同。白蚁触角念珠状,腹基粗壮,前后翅等长;蚂蚁触角膝状,腹基瘦细,前翅
白尾鹿(Odocoileus leucurus;white-tail-deer)
鹿科空齿鹿属的 1种。因奔跑时尾翘起,尾底显露白色而得名。体长 1.83~ 1.98米,肩高 0.92米,尾长约 10~ 28厘米;耳小;角的背枝简单;蹠腺小,长仅约 3厘米,腺周围有白毛。分布于加拿大南部、美国大部和南美洲北部。每年 11~ 12月交配,一雄多雌,妊娠期 196~ 210天,每窝产仔 1~ 2只(多时 3~ 4只)。幼鹿随母鹿生活 1~ 2年, 8个月性成熟。善游泳,能游过 6~ 14千米的水域。有季节性迁徙习性。不喜结群。当大雪或食物缺乏时,在适宜栖息
中枢神经系统中,主要由有髓神经纤维构成的、呈现白色的部分。是与灰质相对而言的。在脊髓中白质包围灰质位于其外侧,含有多种传导路。在脑中除延髓外白质均位于灰质的内侧,尤其是完全被大脑皮质和小脑皮质所包围。
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