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yuanmu
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上海远慕生物有限公司
品牌:Omega
货号:M04-01
产品名称:HT Ladder I(50)(即250ul)
HT DNA Marker I
HT Ladder I(50)(即250ul)(Omega PCR与RT-PCR相关) 上海远慕生物有限公司专业供应各种生物试剂、生化试剂,单抗多抗抗体,各种二抗,标记抗体,抗体抗原,蛋白多肽产品,Elisa酶联免疫试剂盒,各种细胞株、细胞系,各种动物血清,金标试剂盒,放免试剂盒,培养基,毒素 的产品, 实时价格和产品详细说明,敬请来电咨询!
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文献和实验分钟,使用ELONGASE Enzyme Mix对相当于起始RNA 0.5%的经处理及未处理逆转录产物进行35个循环的扩增。 小量RNA检测方法的提高 当仅有小量RNA时,RT-PCR尤其具有挑战性。在RNA分离过程中加入的作为载体的糖元有助于增加小量样品的产量。可以在加入Trizol的同时加入无RNase的糖元。糖元是水溶性的,可以同RNA保持在水相中以辅助随后的沉淀。对于小于50mg的组织或106个培养细胞的样品,无RNase糖元的建议浓度为250μg/ml。 在使用
碳酸二乙酯(DEPC)去除外源性 RNA 酶,通过 RNA 酶的阻抑蛋白 Rnasin 和强力的蛋白质变性剂如异硫氰酸胍抑制内源性 RNA 酶。 RT-PCR 步骤: 1、RNA 的提取: 2、cDNA 的合成: 逆转录体系的组成: 3、PCR 扩增: 50ul PCR 体系的组成: 4、PCR 反应条件: 四、PCR 条件的优化 PCR 条件的优化主要是 ①引物退火温度的调节,一般在引物设计软件推荐温度的上下 2 ℃ 变化寻找最佳退火温度。 ②此外 Mg2+ 浓度的调节也非常
Protocol for competitive RT-PCR
, factor 2-2.5 between the standard amounts gives more accurate results (i.e.: 25 pg; 50 pg; 100 pg; 250 pg). In the following PCR 3-5 µl of cDNA, 1.5 units Taq DNA polymerase (Pharmacia), 200 µM of each dNTP, 250 nM of each primer and 1/10
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