大鼠肾上腺素(EPI) 检测试剂盒

大鼠肾上腺素(EPI) 检测试剂盒

本试剂仅供研究使用

试验原理：

EPI试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知EPI浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将EPI和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中EPI的活性浓度呈比例关系。

试剂盒内容及其配制

自备材料

1． 蒸馏水。

2． 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

3． 振荡器及磁力搅拌器等。

安全性

1． 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2． 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

大鼠肾上腺素(EPI) 检测试剂盒操作注意事项

1． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5． 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8． 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

大鼠肾上腺素(EPI) 检测试剂盒样品收集、处理及保存方法

1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、 保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

试剂的准备

1． 标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：

2． 洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。

大鼠肾上腺素(EPI) 检测试剂盒操作步骤

1． 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2． 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

3． 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5． 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

8． 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9． 在450nm波长处测定各孔的OD值。

性能

1. 灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2. 特异性：不与人其它细胞因子反应。

3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

4.局限性：6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。

结果 判 断 与 分 析

1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的EPI标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的EPI含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

3、检测值范围：0-400ng/ml

4、敏感度： 1.0ng/ml
中文名称：人外周鞘磷脂蛋白22(PMP22)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Peripheral Myelin Protein 22 (PMP22)
中文名称：人肽聚糖识别蛋白2(PGLYRP2)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Peptidoglycan Recognition Protein 2 (PGLYRP2)
中文名称：人ATP结合盒转运蛋白A4(ABCA4)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for ATP Binding Cassette Transporter A4 (ABCA4)
中文名称：人PDZ和LIM域蛋白1(PDLIM1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for PDZ And LIM Domain Protein 1 (PDLIM1)
中文名称：人成神经细胞瘤抑制瘤变蛋白1(NBL1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Neuroblastoma, Suppression Of Tumorigenicity 1
中文名称：人细胞程序性死亡蛋白1配体2(PDCD1LG2)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Programmed Cell Death Protein 1 Ligand 2
中文名称：人肿瘤坏死因子配体超家族成员14(TNFSF14)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Ligand
中文名称：人Thy1细胞表面抗原(Thy1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Thy1 Cell Surface Antigen (Thy1)
中文名称：人粒细胞集落刺激因子受体(GCSFR)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Colony Stimulating Factor Receptor, Granulocyte
中文名称：人白介素17受体A(IL17RA)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Interleukin 17 Receptor A (IL17RA)
中文名称：人Ⅱ类主要组织相容性复合体DQβ1(MHCDQβ1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Major Histocompatibility Complex Class
中文名称：人非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶1(PTPN1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Protein Tyrosine Phosphatase, Non Receptor Type
中文名称：人嘌呤霉素敏感性氨肽酶(PSA)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Puromycin Sensitive Aminopeptidase (PSA)
中文名称：人WAP四二硫化物核心域蛋白5(WFDC5)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for WAP Four Disulfide Core Domain Protein 5
中文名称：人氧固醇结合蛋白样蛋白8(OSBPL8)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Oxysterol Binding Protein Like Protein 8
中文名称：人衔接因子相关蛋白复合体2μ1(AP2μ1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Adaptor Related Protein Complex 2 Mu 1 (AP2m1)
中文名称：人5-甲基四氢叶酸高半胱氨酸甲基转移酶(MTR)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for 5-Methyltetrahydrofolate Homocysteine
中文名称：人前列腺转谷氨酰胺酶(TGM4)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Transglutaminase 4, Prostate (TGM4)
中文名称：人维甲酸受体应答基因1(RARRES1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Retinoic Acid Receptor Responder 1 (RARRES1)
中文名称：人四加半LIM域蛋白1(FHL1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Four And A Half LIM Domains Protein 1 (FHL1)
中文名称：人溶质载体家族16成员1(SLC16A1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Solute Carrier Family 16, Member 1 (SLC16A1)
中文名称：人趋化因子C-C-基元受体5(CCR5)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Receptor 5 (CCR5)
中文名称：人Canopy 2同源物(CNPY2)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Canopy 2 Homolog (CNPY2)
中文名称：人肌球蛋白重链8(MYH8)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 8, Skeletal Muscle, Perinatal (MYH8)
中文名称：人B-淋巴酪氨酸激酶(BLK)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for B-Lymphoid Tyrosine Kinase (BLK)
中文名称：人电压依赖性阴离子通道蛋白1(VDAC1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Voltage Dependent Anion Channel Protein 1
中文名称：人血小板膜糖蛋白Ⅰbα多肽(GP1Ba)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Glycoprotein Ib Alpha Polypeptide, Platelet
中文名称：人Ras相关C3肉毒菌毒素底物1(Rac1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Ras Related C3 Botulinum Toxin Subst英文名称：Rate 1
中文名称：人Ras同源基因家族成员A(RHOA)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Ras Homolog Gene Family, Member A (RHOA)
中文名称：人细胞分裂周期因子42(CDC42)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Cell Division Cycle Protein 42 (CDC42)
中文名称：人肝细胞生长因子激活因子(HGFAC)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Hepatocyte Growth Factor Activator (HGFAC)
中文名称：人分拣连接蛋白9(SNX9)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Sorting Nexin 9 (SNX9)