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DMEM high glucose medium
DMEM高糖培养基 （含L谷氨酰胺，不含丙酮酸钠，不含酚红，含HEPES）培养条件：
完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。
培养条件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%
DMEM高糖培养基 （含L谷氨酰胺，不含丙酮酸钠，不含酚红，含HEPES）制备:
1. 分离和培养宿主细胞；
2. 通过病毒介导或者其它的方式将多能性相关的基因导入宿主细胞；
3. 将病毒感染后的细胞种植于饲养层细胞上，并在ES细胞专用培养体系中培养，同时在培养期间根据需要加入相应的小分子物质以促其重编程；
4. 出现ES样克隆后进行IPS细胞的鉴定（细胞形态、特定基因的表达、表观遗传修饰、体外分化潜能等方面）。
细胞生长：贴壁生长
细胞形态：上皮样；多角形
细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次
DMEM高糖培养基 （含L谷氨酰胺，不含丙酮酸钠，不含酚红，含HEPES）传代方法：
收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
一．如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。
二．如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：
1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。
3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。1:3~1:6传代；2~3天1次
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文献和实验细胞培养基成分复杂，包括盐类、糖类、维生素、氨基酸、代谢前体、生长因子、激素和微量元素。对这些物质的需求因细胞而有差异，这也导致大量的不同培养基配方出现。主要碳源物质通常是葡萄糖，有时也会使用半乳糖代替，这是因为半乳糖的代谢速度较慢。氨基酸（尤其是 L - 谷氨酰胺）和丙酮酸盐也可作为碳源。除了营养成分，培养基也会帮助维持培养体系的 pH 和渗透压。pH 的维持依靠一种或多种缓冲液体系，最常见的包括 CO2/NaHCO3、磷酸盐和 HEPES 等，血清也可以作为完全培养基的缓冲液（文章末尾会送
性，一般与激素或其它物质起相互协同或加成作用。另一种常见的添加物就是血清替代物，目前已有许多可完全或部分替代传统培养液中血清成分的商业产品，其稳定性较好，但批次间仍有差别，产品的成分也不很确定。2、细胞培养基配制 2.1 干粉培养基原倍液的配制 1）配制过滤除菌的细胞培养基 1）阅读培养基使用说明，确定需要添加何种添加剂（如NaHCO3、L-谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等）。 2）根据所需将培养基全部倒入一容器中，用少量注射用水（20℃～30℃）将袋内残留培养基洗下，并入容器。加注射用水至总体
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