RPMI 1640培养基 （含L谷氨酰胺）

RPMI 1640培养基 （含L谷氨酰胺），原代细胞|细胞系|细胞株|菌种；细胞库管理规范，提供的细胞株背景清楚，提供参考文献和最优培养条件！
RPMI 1640培养基 （含L谷氨酰胺）培养条件：
完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。
培养条件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%
RPMI 1640培养基 （含L谷氨酰胺）制备:
1. 分离和培养宿主细胞；
2. 通过病毒介导或者其它的方式将多能性相关的基因导入宿主细胞；
3. 将病毒感染后的细胞种植于饲养层细胞上，并在ES细胞专用培养体系中培养，同时在培养期间根据需要加入相应的小分子物质以促其重编程；
4. 出现ES样克隆后进行IPS细胞的鉴定（细胞形态、特定基因的表达、表观遗传修饰、体外分化潜能等方面）。
细胞生长：贴壁生长
细胞形态：上皮样；多角形
细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次
RPMI 1640培养基 （含L谷氨酰胺）传代方法：
收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
一．如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。
二．如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：
1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。
3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。1:3~1:6传代；2~3天1次
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