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文献和实验;移液管10ml 1支、2ml 1支、0.5ml 1支;20ml刻度试管;10ml容量瓶;小培养皿;试管架,药匙;石英砂适量。三、试剂1. 乙酸乙酯:连二亚硫酸钠(Na2S2O4,为强还原剂,俗称保险粉);2. 1%TTC溶液:准确称取TTC 1.0g,溶于少量蒸馏水中,定容至100ml;3. 0.4%TTC溶液:准确称取TTC 0.4g,溶于少量蒸馏水中,定容至100ml;4. 磷酸缓冲液(1/15mol/L,pH7.0);5. 1mol/L硫酸:用量筒量取比重1.84的浓硫酸55ml,边搅拌
(medicine spoon)×1 (Erlenmeyer flask) 100 ml×3 滴管(drip tube;dropper)×2 烧杯(beaker) 500 ml×1 玻棒(Glass stic)×2 250 ml×3 木试管夹(test tube clamp;test tube holder)×1 100 ml×3 胖肚吸管(straws) 25 ml×1 50 ml×2 10 ml×1 容量瓶(volumetric flask) 100 ml×2 乳钵(morta)×
免疫检测仪OD490nm处测量各孔的吸光值。7.同时设置调零孔(培养基、MTT、二甲基亚砜),对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜)悬浮细胞:1)收集对数期细胞,调节细胞悬液浓度1×106/ml,按次序将①补足的1640(无血清)培养基40ul ;②加Actinomycin D(有毒性)10ul用培养液稀释 lg/ml,需预试寻找最佳稀释度,1:10-1:20);③需检测物10ul;④细胞悬液50ul(即5×104cell/孔),共100ul加入到96孔板(边缘孔用无菌水填充
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