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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
6个月
- 英文名：
WB blocking solution
- 库存：
大量
- 供应商：
上海信誉
产品用途: 科研ELISA检测试剂盒.提供实验代测服务.
产品询价：你可以通过电话，邮件，传真或在线客户方式询价
检测种属：大小鼠，人，猪，豚鼠,兔子，牛，羊，鸡，鸭Elisa试剂盒等种属
产品样本：体液，血清，血浆，细胞培养上清液，尿液，组织匀浆，心房水标本等。
贮藏条件：试剂盒保存2-8℃，有效期6个月
WB封闭液（脱脂奶粉）安全性：1，避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。4．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。5．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。6．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。7．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。8．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。9．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。10．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。11．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。12．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
WB封闭液（脱脂奶粉）说明
1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任WB封闭液（脱脂奶粉）何影响。
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文献和实验封闭，就会背景脏得不得了。还有一点就是脱脂奶粉的 IgG 能和抗山羊的二抗有交叉反应……所以……第二种封闭液就是 BSA，这个相对来说贵一些，一般会用于一些磷酸化的 WB 里。但是，有些 BSA 偶联的多肽要做 WB 的话，就绝对不能用 BSA 作为封闭液。第三种封闭液估计你们不会特别常用，其实就是吉利丁，做过布丁或者慕斯蛋糕的同学可能知道这是啥。其实就是 Fish Gelatin，鱼明胶，但是这种封闭液成分价钱很傲娇，所以平时没什么人会使用这个。还有一种比较常用的封闭液，就是 0.25 - 2%
① 膜封闭时间不够，室温下通常摇床孵育膜 1h，出现这种情况可以更换合适的封闭液或者适当延长封闭的时间； ② 抗原抗体免疫过程中一抗稀释度太高，可以多设置几组一抗浓度，摸索最适宜的抗体稀释度； ③ 在整个实验过程中膜发生干燥或手套反复接触过也会发生背景值高的情况，因此实验过程中要注意保持膜的湿润，使用镊子夹取膜。 3、WB 结果中有杂带干扰 ① 抗体纯度不高会产生非特异性条带影响结果，高纯度抗体条带特异性更好，建议更换抗体； ② 一抗浓度过高，降低一抗稀释比，目的条带和杂带可能会减弱
。下面是来自使用者的反馈数据： 1、蛋白含量低，得到的WB信号弱--SignalBoostTM可以增强信号，检测到低丰度蛋白： 样品：K562细胞全细胞裂解液。 （Lane 1: 25μg总蛋白；Lane 2: 5μg总蛋白；Lane 3: 2.5μg总蛋白） 一抗：anti-PKC（Ab－2）小鼠单抗（MC5）（货号OP74），分别用5%脱脂奶粉PBST溶液（图A）和SignalBoost Solution 1（图B）按照1：1000比例稀释。 二抗：Rabbit anti
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