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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Perfectstart Taqman qPCR master mix
- 库存:
大量
- 供应商:
上海瑶韵生物
为了满足生物领域日益增加的要求,Omega新开发的基于磁珠的纯化方式,以其高结合力和高纯度的核酸产物等优越性,已经在欧美市场得到广泛的接收。Omega的磁珠纯化方式,与目前大部分公司采用的硅磁颗粒不同,它采用的是纳米磁珠同正离子相藕连而成的微型颗粒,该颗粒的结合能力是传统硅磁的10-30倍,因而能大大提高核酸产量和纯度,目前该产品处于世界最领先的水平。此外,为满足不同客户的需求,Omega还开发了一些成本较低的核酸纯化试剂盒,如盐析法纯化血液或组织基因组DNA纯化试剂盒,玻璃奶纯化试剂盒以及溶液型的RNA抽提试剂盒。
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文献和实验一般来讲,进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液,只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高,所以每个样品至少要做3个平行孔,以防在后面的数据分析中,由于Ct相差较多或者SD太大,无法进行统计分析。通常来讲,反应体系的引物终浓度为100-400mM;模板如果是总RNA一般是10ng-500,如果cDNA,通常情况下是1ul或者1ul的10倍稀释液,要根据目的基因的表达丰度进行调整。当然这些都是经验值,在操作过程中,还需要根据所用
成功做完了逆转录,这时候可能有些疲累了。筛引物、做定量的时候要加样的孔也较多,即使使用了 qPCR 预混液,也有加错样的可能发生。诺唯赞的 ChamQTM SYBR® Color qPCR Master Mix 系列(Q411 /Q421 /Q431 /Q441)提供不同颜色的试剂,利用移液过程中的变色效应,追踪移液过程,可以极大的减少移液错误。 引物设计有原则 在使用 SYBR 染料法时,引物设计需遵循以下原则:引物长度 18~25bp,产物长度 80~300bp,GC 含量 40~60
Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手
。现在已经涉及到生命科学研究的各个领域,比如基因的差异表达分析,SNP 检测,等位基因的检测,药物开发,临床诊断,转基因研究等。 在 Real-time qPCR 技术的发展过程中,定量 PCR 仪的发展起了至关重要的作用。1995 年,美国 PE 公司(已经并入 Invitrogen 公司)成功研制了 Taqman 技术,1996 年推出了首台荧光定量 PCR 检测系统,通过检测每个循环的荧光强度,通过 Ct 值进行数据分析。从而荧光定量 PCR 获得广泛应用。现在的定量 PCR 仪有 ABI
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