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荧光定量PCR (qPCR)-服务到投稿 / 经验丰富 /

价格低-辉骏生物
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  • 辉骏生物分子生物学平台提供定量荧光定量pcr实验 :引物设计,合成. RNA抽提,反转录,PCR上机检测;qPCR预实验及正式实验检测,标准品及标准曲线制备.实时监测,特异性强,精确定量!定量pcr技术服务外包!
  • 2026年04月17日
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      荧光定量PCR (qPCR)-服务到投稿 / 经验丰富 / 价格低-辉骏生物

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      辉骏生物

    实时荧光定量PCR(qPCR)是对基因进行相对或绝对定量的实验方法。本公司可提供基于SYBR Green染料法的荧光定量PCR服务。

    荧光定量PCR(qPCR)技术原理

    PCR反应体系中加入荧光基团,随着PCR循环数的递增,PCR产物不断积累,荧光信号也会相应的增加,这样就可以通过荧光强度的变化来对PCR反应进行实时的监测。在PCR扩增的指数时期,模板的CT值和该模板的起始拷贝数存在线性关系,所以成为定量的依据。

    荧光定量PCR扩增曲线.jpg

    辉骏生物技术优势

    1.实时监测:通过扩增曲线能够实时监测PCR产物的积累。

    2.特异性强:实验完成后,溶解曲线的分析可以验证扩增产物的特异性,降低假阳性。

    3.精确定量:利用扩增进入指数增长期的CT值来定量测定起始模板量,从而实现了极为精确的核酸定量检测。

    荧光定量PCR技术优势-辉骏生物.jpg

    荧光定量PCR (qPCR)实验流程-辉骏生物

    1.引物设计与合成

    2.基因模板制备:RNA提取和反转录,或DNA提取;

    3.qPCR预实验:检测目的基因和内参基因的扩增情况;

    4.qPCR正式实验:全部样本做qPCR,每个样本设置三复孔;确定样本扩增产物单一,内参基因CT值正常;

    5. 数据分析和出具报告:按照客户要求计算样本间的目的基因表达差异,并作柱形图。

    荧光定量PCR (qPCR)服务信息-辉骏生物

    项目名称

    客户提供

    结果交付

    实验周期

    荧光定量PCR 原始样本(干冰运输,广州地区可上门取样)
    实验信息表(样本信息,待测基因序列,内参要求等)
    1、qPCR原始数据
    2、扩增曲线和溶解曲线
    3、定量分析数据
    4、实验报告
    2-4周

    产品细节图片1

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    相关实验
    • qPCR常见问题及其分析

      一般来讲,进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液,只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高,所以每个样品至少要做3个平行孔,以防在后面的数据分析中,由于Ct相差较多或者SD太大,无法进行统计分析。通常来讲,反应体系的引物终浓度为100-400mM;模板如果是总RNA一般是10ng-500,如果cDNA,通常情况下是1ul或者1ul的10倍稀释液,要根据目的基因的表达丰度进行调整。当然这些都是经验值,在操作过程中,还需要根据所用

    • qPCR 实验中遇到这 3 个问题怎么办?

      荧光定量 PCR 的常见异常结果除了扩增曲线异常、融解曲线异常两类常见情况外,qPCR 实验中通常还会遇到以下三大类情况: 1. 复孔间重复性差怎么办? 复孔间重复性差一般会有以下两种情况: (1)CT 值很大,如 CT≥ 30,重复性差属于正常现象。该现象符合泊松分布,即在有效模板量很少的情况下,模板与引物的碰撞存在随机性,直接导致复孔间的 CT 值差异较大。 解决方法:如果融解曲线没有杂峰,无模板阴性对照同目的基因的 △CT 值为 3 or 5 以上,那 CT 值为准确的,可多设置

    • ChIP protocol for X. laevis Lens1/FoxE3 enhancer

      SDS lysis buffer/1x proteinase inhibitor cocktail (2.5 µl of 200 x stock from Upstate EZ ChIP kit). Roughly dissociate heads by pipetting, and transfer them into a 2 ml dounce homogenizer. Total volume is ~700 µl. �SDS lysis

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