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北京鼎国
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箱
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文献和实验。 28181 QIAquick 96 PCR Purification Kit——采用真空抽滤的方法,利用硅胶膜技术25分钟内从PCR反应体系中回收高纯度的DNA,回收率高达90%(100bp~10kb),可除掉 99.5 %的引物,无需另外去除石蜡油,无需乙醇沉淀,无需酚、氯仿等有机试剂。纯化产物可直接用于芯片点样或测序。 Telechem 公司:世界著名的芯片供应商,提供各种芯片方面的耗材和试剂。其PCR产物纯化试剂盒利用高级滤膜技术,具有价格低、通量高、速度快等优点。无需乙醇沉淀,无需酚、氯
和活细胞数,计细胞活力。 死细胞能被台盼兰染上色,镜下可见深兰色的细胞,活细胞不被染色,镜下呈无色透明状。 活力测定可以和细胞计数合起来进行,但要考虑到染液对原细胞悬液的加倍稀释作用 。范例: T75 monolayer culture 制成10ml 细胞悬浮液,取0.1 ml 溶液与0.1ml trypan blue 混合均匀于试管中,取少许混合液加入血球计数盘,计数四大方格内之 细胞数目。 活细胞数/方格:55 ,62, 49, 59 死细胞数/方格:5, 3, 4, 6 细胞
浸入缓冲液3以终止反应。 (8)复染,可用1%伊红、1%苏木精、1%亮绿或5%的焦宁(又称派咯宁丫)(pyronin 丫)10~30s。 (9)流水洗5~10min,直至水无色为止。 (10)在切片未干前,以PBS/甘油封固切片,如要永久保存,可以用DPX在盖片四周封固。为去除水份,在封固前可进行梯度酒精脱水,透明,DPX封固,但每步时间仅需几秒钟,时间过长易致褪色。 几点说明 ①缓冲液1,2,3配制法见附录。缓冲液1中BSA用量大,价贵,如无法负担可略去
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