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- 文献和实验
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122
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北京鼎国
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箱
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文献和实验: (1)移液枪:200ul、10ul (2)吸头:200ul、20ul (3)EP管1.5ml、100ul (4)水浴箱 2,实验器具的处理与准备 塑料制品:(包括吸头、EP管等) 将塑料制品逐个浸泡于1‰DEPC水中(必要时小枪头需要用吸管打入DEPC水)37℃过夜,然后送至高压3次,后在80℃烘烤箱中烘干(或置于37℃中8小时左右烘干),试验前将枪头放入吸头台。 3,试剂配制和准备: (1)DEPC水:泡实验器具的DEPC水的配制:1000ml双蒸水中加1mlDEPC,放在1000ml
药物的介质,而加药组加入不同浓度的药物。8.避免血清干扰。用含15%胎牛血清培养液培养细胞时,高的血清物质会影响试验孔的光吸收值。由于试验本底增加,会试验敏感性。因此,一般选小于10%胎牛血清的培养液进行。在呈色后,尽量吸净培养孔内残余培养液。实验步骤贴壁细胞:1.收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔,(边缘孔用无菌PBS填充)。2.5%CO2,37℃孵育,至细胞单层铺满孔底(96孔平底板),加入浓度梯度的药物,原则上,细胞贴壁后即可
值。由于试验本底增加,会试验敏感性。因此,一般选小于 10% 胎牛血清的培养液进行。在呈色后,尽量吸净培养孔内残余培养液。实验步骤贴壁细胞:1. 收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,每孔加入 100ul, 铺板使待测细胞调密度至 1000 - 10000 孔,(边缘孔用无菌 PBS 填充)。2.5%CO2,37℃ 孵育,至细胞单层铺满孔底(96 孔平底板), 加入浓度梯度的药物, 原则上,细胞贴壁后即可加药,或两小时,或半天时间,但我们常在前一天下午铺板,次日上午加药. 一般 5 - 7 个梯度, 每孔
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