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- Amresco
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- E891-25PK
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
NUCLEASELIMINATOR™
- 库存：
大量
- 供应商：
上海瑶韵生物
- 规格：
E891-25PK
AMRESCO产品价值平台：创新 + 质量 = 价值 便利 省时 高性能 高质量 安全 先进技术 经济（性价比高）
AMRESCO产品介绍: 产品服务于生物科研，包括分子生物学，蛋白组学，细胞生物学等领域；电泳，检测，细胞培养等技术。
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文献和实验内的，而酶只有在甘油浓度 具体操作如下：在 1.5 mL 离心管中依次加入DNA（1 μg/μl）20 μg10× 酶切 buffer 4.0 μl限制性内切酶（10 U/μl）5.0 μl加 ddH2O 至 500 μl在最适温度下消化 1-3 hr。消化结束时可取 5 μl 电泳检测消化效果。如果消化效果不好，可以延长消化时间，但超过 6 hr 已没有必要。或者放大反应体积，或者补充酶再消化。如仍不能奏效，可能的原因是 DNA 样品中有太多的杂质，或酶的活力下降。消化后的 DNA 加入 1/10
溶剂，在高浓度盐的溶液中，加入无水乙醇更容易让质粒沉淀。2. 在小离心机中 12 000 rpm，4 ℃，离心 5 min，收集沉淀的质粒。3. 小心倒去上清液，将离心管倒置在纸巾上，排干残留的无水乙醇。4. 加入 1 ml 的 70% 乙醇水溶液，盖紧盖管，颠倒数次，在小离心机中 12 000 rpm，4 ℃，2 min，回收质粒。Tips：在质粒提取过程中，溶液 I，II，Ⅲ 中的盐还残留在离心管中，这一步主要作用是溶解残留的盐，质粒沉淀在下面，达到提纯的效果。5. 倒掉上清，倒置在纸巾上，在空气中将
8μl水、1μlligase Buffer、1μl ligase ，4℃过夜；次日转化涂板。 酶切 配置可酶切共10μl质粒的酶切反应体系（双酶切）： （提示 在克隆设计时尽量使用好切的内切酶，且注意这两个酶有比较兼容的Buffer，即在这种公用Buffer中，两酶的效力变化不大。酶切体系根据需要，可加入BSA。） 酶切体系 混匀 37℃，酶切3小时。 （提示 关于酶量的问题。通常的内切酶效价在10U/μl左右，3μl内切酶相当于30U，足够切10μl的质粒。因为通常小提
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