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- R&D
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- 2025年07月07日
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多克隆
R&D Systems总公司于1976年成立于美国，在美国NASDAQ上市 （TECH）。公司一直致力于各种细胞因子及其相关分子的生产研发。R&D Systems的产品覆盖面广，种类丰富，质量稳定可靠，其生产的各种ELISA试剂盒、重组因子及抗体以其卓越的品质赢得了世界各国科研及临床诊断机构的青睐。
公司主要生产和研发多种蛋白、抗体、Elisa反应试剂盒、ELISpot试剂盒、流式细胞计数试剂盒、mRNA 定量试剂盒、细胞筛选试剂盒、细胞培养试剂等产品。R&D是世界知名的细胞因子供应商.如白介素,生长因子,趋化因子,黏附因子,神经营养因子等。
产品覆盖面广：包括白介素、生长因子、趋化因子、粘附分子、神经营养因子、MMPs/TIMPs、受体等相关产品。
产品种类丰富：涵盖了百余种细胞因子类ELISA试剂盒, 重组细胞因子类蛋白（209种之多）及相关的多达250余种单克隆、多克隆抗体;细胞凋亡、Caspase及胶原酶系列以及细胞因子类等热点领域。细胞凋亡类检测试剂及试剂盒;各种酶、底物及抑制剂类 , 其产品完全可满足科研的需要。
质量稳定可靠：其提供的试剂盒具有准确、灵敏度高、重复性好、特异性高等特点;多种高纯度的天然和重组细胞因子、可溶性细胞因子受体，其纯度和活性均经过严格检测，符合NIBDC/WHO国际标准，冻干粉形式更容易保存。
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文献和实验将含有目的基因载体的农杆菌EHA105在含有50mg/L Kanamycin的YM平板上划线,28℃黑暗培养3天,用一金属匙收集农杆菌菌体,将其悬浮于共培养CM液体培养基中,调整菌体浓度至OD600为0.3-0.5,加入AS，使AS终浓度为100mΜ,即为共培养转化水稻用的农杆菌悬浮液。 2.3. 水稻愈伤组织与农杆菌的共培养 挑选状态较好（继代培养5-7天、色泽淡黄）的愈伤组织放入100ml无菌三角瓶中,加入适量农杆菌悬浮液(保证有足够的菌液与材料接触即可),室温放置20min,并不时晃动
双元载体的农杆菌转化1.1农杆菌感受态细胞的制备1.1.1. 取-70℃保存的EHA105于含50μg/ml链霉素平板划线，28℃培养。1.1.2. 挑取单菌落接种于5ml YM液体培养基中，220rpm 28℃振荡培养12-16 hr。1.1.3. 取2ml菌液转接于100ml YM液体培养基中，28℃220rpm振荡培养至OD600=0.5。1.1.4. 转入无菌离心管，5000rpm离心5min,去上清液。1.1.5. 加入10ml预冷的0.1M的CaCl2溶液，轻轻悬浮细胞，冰上放置
一．农杆菌感受态细胞的制备 （同大肠杆菌质粒DNA的提取），然后将其转化大肠杆菌，再提取大肠杆菌的质粒DNA进行酶切鉴定。取-70℃保存的EHA105于含有50μg/ml链霉素平板划线，28℃培养2天。挑单菌落接种于5ml YM（0.5g/L KH2 PO4 ,10 g/L Mannitol,2 g/L L-Glutamine,0.2 g/L NaCL,0.2 g/L MgSO4 ,0.3 g/L Yeast extract,PH7.0）液体培养基中，220rpm，28℃振荡培养18 hr
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