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- 2026年05月28日
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文献和实验与 TritonX100 等细胞通透剂。 2. 蛋白酶K一般工作液浓度为 20 μg/ml,亦可自行将浓缩液配制1-10 mg/ml。蛋白酶K可用 PBS 配制，也可用蛋白酶K缓冲液(100 mM Tris HCl pH8.0, 50 mM EDTA)，分装后-20ºC保存。 3. 蛋白酶K反应时间一般为10-30 min，具体时间长短与切片厚薄有关，4 μm左右的片子可以通透 10 min，如切片厚度30 μm左右的可延长至30 min，需实验摸索最佳时间。通透时间过长易脱片、过短起不到通透效果。 四
1、在什么情况下使用TritonX-100？（1）Triton X-100化学名称为聚乙二醇辛基苯基醚，是一种去污剂。在免疫组织化学(>10um厚切片) 和免疫细胞化学中一般用Triton X-100 作为细胞通透剂，在膜上打孔。（2）其作用原理：Triton X-100 可以溶解细胞膜、细胞核膜、细胞器膜上的脂质而使抗体及大分子结构的物质进入胞浆和胞核内，故在细胞免疫组化时尤为推荐使用，这样抗体就能顺利进入胞内与相应抗原结合。（3)Triton X-100既是一种表面活性剂，也有抗
最终的特异性染色。 细胞通透的时间选择 1. 蛋白酶 k 的目的是通透细胞膜和核膜，从而使反应试剂充分进入细胞核进行反应，提高阳性率。但浓度过高或孵育时间太长容易脱片，只要不脱片，好像影响不大，其作用类似与 TritonX100 等细胞通透剂。 2. 蛋白酶 K 一般工作液浓度为 20 μg/ml, 但浓缩液可配制 1-10 mg/ml，可用 PBS 配制，也可用蛋白酶 K 缓冲液（100 mM Tris HCl pH8.0+50 mM EDTA）；然后分装成小份，用完一支
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