通用型生物素探针原位杂交试剂盒HRP显色系统

组化染色背景高？没信号？一篇文章带你快速掌握免疫组化！

素与生物素高度特异性结合的关系来放大免疫组化信号，但此方法有产生内源性生物素背景的可能性。而酶标聚合物法，利用聚合物与二抗结合，形成聚合物-二抗复合物，实现信号放大，该方法不受内源性生物素的干扰。 表 2 免疫组化多种检测系统分类 图 2 酶标聚合物法检测系统 图 3 链霉亲和素-生物素法检测系统 在显色法中，针对 HRP（辣根过氧化物酶）显色系统，其常用底物为DAB/AEC（HRP/DAB 呈棕褐色染色，具有很好的光稳定性，HRP/AEC 呈红色染色，在阳光下会褪色，不易保存。 基础 IHC

原位杂交组织化学杂交体检测

性标记探针的检测     根据标记物的不同，非放射性标记探针原位杂交信号的显示方法也不同，如果用荧光素标记探针，杂交信号可直接在荧光显微镜下观察，如果用辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶标记探针，原位杂交信号可用相应底物的酶促反应来显示。目前．常用非放射性标记物多为半抗原，以半抗原标记探针的原位杂交信号可通过免疫酶组织化学或亲和组织化学技术显示。如用生物素标记探针进行原位杂交，带有标记探针的杂交体可以根据亲和素―生物素亲和组织化学原理，或生物素―抗生物素抗体的免疫细胞化学原理进行检测。以地高辛标记探针

【分享】原位杂交的基本方法

干燥。六、显示根据核酸探针标记物的种类可进行不同显色处理，原位杂交探针一般是用半抗原地高辛标记的，借助于间接加入的酶（酶标的抗地高辛抗体）使底物显色，常用的酶有辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶（AP）。1.AP显色系统：－AP+BCIP→BCL-OH+PiBCL-OH+NBT →蓝紫色↓2. HRP显色系统：－HRP+H2O2 →HRP.H2O2HRP.H2O2 +ODA-NH2 →棕色↓细胞或组织的原位杂交切片显色后可进行半定量检测，但要注意严格控制实验条件的同一性，包括切片的厚度、核酸