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胃蛋白酶试剂盒说明书

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  • XY-60091
  • 2025年07月14日
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      Pepsinkit

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      上海信裕

    胃蛋白酶试剂盒说明书
    Pepsin(HY-60091)KIT
    (胃液 胃组织)
    (每只样本都要做对照管,此试剂盒只能测25个样本)
    测定原理:
    胃蛋白酶可水解蛋白产生含酚的氨基酸,而酚试剂可被含酚的氨基酸还原成蓝色物质,通过比色可测定胃蛋白酶活力。
    试剂盒组成和配制:(50T)
    1. 试剂一:液体24ml×1瓶,4℃条件下可稳定保存90天。
    2. 试剂二:液体6ml×2瓶,4℃条件下可稳定保存30天。
    3. 试剂三:液体100ml×1瓶,4℃条件下可稳定保存90天。
    4. 试剂四:液体9ml×2瓶,避光4℃条件下可稳定保存60天。
    5. 试剂五:1mg/ml标准品储备液1ml×1瓶,标准品稀释液20ml×1瓶,4℃条件下可稳定保存30天。
    50ug/ml标准应用液的配制:取1mg/ml标准品储备液50ul用标准品稀释液稀释至1ml,即1:9(体积比)稀释,充分混匀后,4℃条件下可稳定保存至少10天。
    6. 试剂六:匀浆介质60ml×2瓶,4℃条件下可稳定保存30天。
    胃蛋白酶试剂盒说明书操作步骤:
    1. 样本前处理:
    (1) 胃液:先做预试,再根据活力大小或直接取胃液进行检测或用匀浆介质进行适当稀释后再测。
    (2) 组织:准确称取组织重量(不要超过0.2g),按重量体积比加9倍体积的匀浆介质匀浆,2500转/分离心10分钟,取上清即10%的匀浆,进行预试后根据活力大小或直接进行检测或用匀浆介质进行适当稀释后再测。
    2. 样本及试剂在测试前均要平衡至室温(室温在20℃以上可放置室温;室温在20℃以下可将试剂置于37℃水浴中预温10分钟)
    3. 操作表:
    胃蛋白酶操作步骤 单位(ul)
    —————————————————————————————————————
    测定管 测定空白管*
    —————————————————————————————————————
    样本 40 40
    —————————————————————————————————————
    37℃水浴预温2分钟
    —————————————————————————————————————
    试剂一 -- 400
    试剂二 200 200
    —————————————————————————————————————
    充分混匀,37℃准确水浴10分钟
    —————————————————————————————————————
    试剂一 400 --
    —————————————————————————————————————
    充分混匀,37℃水浴10分钟,3500转/分离心10分钟, 取上清进行显色反应。
    —————————————————————————————————————
    标准管 标准空白管 测定管 测定空白管*
    —————————————————————————————————————
    50ul/ml标准应用液 300 -- -- --
    标准品稀释液 -- 300 -- --
    上清 -- -- 300 300
    试剂三 1500 1500 1500 1500
    试剂四 300 300 300 300
    —————————————————————————————————————
    充分混匀,37℃水浴20分钟后 取出,660nm,1光径,蒸馏水调零,比色。
    注:*测定空白管因不同的样本之间有差距,所以要求每只样本都要做自身测定空白管;而标准及标准空白管只需各做1-2只。
    胃蛋白酶试剂盒说明书结果计算
    1. 胃液中胃蛋白酶活力的计算:
    公式:胃蛋白酶活力(U)=(测定管OD值-测定空白管OD值)/(标准管OD值-标准空白管OD值)×标准品浓度(50ug/ml)÷反应时间10min×稀释倍数*
    注:*稀释倍数=反应总体积0.64ml/取样量0.04ml×样本测试前稀释倍数
    2. 组织中胃蛋白酶活力计算:
    公式:组织中胃蛋白酶活力(U)=(测定管OD值-测定空白管OD值)/(标准管OD值-标准空白管OD值)×标准品浓度(50ug/ml)÷反应时间10min×稀释倍数*÷匀浆蛋白含量(mgprot/ml)
    注:*稀释倍数=反应总体积0.64ml/取样量0.04ml×样本测试前稀释倍数

    胃蛋白酶试剂盒说明书注意事项:
    1. 样品测定值超过上限,用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。
    2. 本法以定值血清为标准,准确性高。
    3. 本产品仅用于体外诊断,内含叠氮钠,应避免直接接触皮 肤和眼睛,切勿吞咽。
    4. 本产品应在2~8℃避光贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。
    本试剂盒主要技术指标:
    1、线性范围:0-18U/ml
    2、精密度:批内变异系数:CVw<8.3%;
    批间变异系数:CVw < 9%
    3、灵敏度:<1.2U/ml

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      h)即可。2. 修复大法——不仅仅是「煮一煮」微波炉修复:简单易行效果好,CST 推荐使用微波炉完成修复。合适的修复液:根据抗体说明书使用合适的修复液。用柠檬酸修复后,切片需浸泡在修复液中,自然冷却;而用 EDTA 修复后,切片可直接从修复缸中取出,直接进行下一步。注:使用不同的修复方式和不同生产商的抗体检测人肺癌组织中 EGFR 的表达。第一排为 CST 的 EGF Receptor (D38B1) XP® Rabbit mAb(#4267),EDTA 的修复方式明显优于柠檬酸盐及胃蛋白

    • 酶活性测定的质量保证

      酶测定大多使用商品试剂盒,由于酶促反应的影响因素较多,造成各实验室间酶活性结果差异较大。为了提高酶活性测定的准确性和精密度,使酶活性测定结果在方法间、实验室间具有可比性,消除参考范围的多重混乱,国际临床化学联合会(IFCC)提出了多种酶测定的推荐方法。我国检验学会也公布了一些酶的推荐方法。当前酶试剂盒生产厂较多,在选购试剂盒时要仔细阅读试剂盒说明书,对试剂盒所用方法的原理、试剂配方(包括缓冲液、底物、添加剂等)有所了解,选择卫生部临床检验中心推荐的常规方法的试剂盒。有些项目没有推荐常规方法,应该选择

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