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cOmplete ULTRA Protease Inhibitor Tablets是一种广谱型的蛋白酶抑制剂混合片剂,在各类应用中保全您的蛋白。
规格:应用于50ml裂解液的片剂,及应用于10ml裂解液的片剂,分别为玻璃瓶装及铝箔便捷包装。
重组蛋白纯化效果不好?
您有没有考虑到除了纯化体系之外,还有一个可能性:靶蛋白在分离纯化过程中的被细胞蛋白酶无情地水解了 ,这些部分降解且长短不同的肽段被一起纯化出来,导致了特异性不佳的蛋白纯化结果。
蛋白酶存在于所有的活细胞中,细胞裂解时释放的蛋白酶将导致目标蛋白的快速水解。在蛋白、分离和纯化的过程中,对蛋白酶进行有效的抑制将提高实验产量及保证蛋白正常功能,并提高实验结果的重复性。
在动物组织的提取液中,主要的蛋白酶种类是丝氨酸、半胱氨酸和金属蛋白酶;在植物组织的提取液中,主要的蛋白酶种类是丝氨酸、半胱氨酸蛋白酶。细菌裂解液中包含了丝氨酸和金属蛋白酶。常见的PMSF可抑制丝氨酸蛋白酶和半胱氨酸蛋白酶,但需小心称量并有剧毒。
cOmplete ULTRA Protease Inhibitor Tablets——通用的广谱型片剂
含有7-8种强效的蛋白酶抑制剂组分,对多种蛋白酶活性具有抑制作用,保护目标蛋白在细胞裂解的过程中维持其结构完整性和功能性。
cOmplete ULTRA Protease Inhibitor Tablets的蛋白酶抑制性能在E. coli.、酵母、植物细胞及多种哺乳动物细胞系(如HEK-293和CHO)中进行了优化,对各种细胞中的丝氨酸、半胱氨酸、天冬氨酸蛋白酶进行完全的抑制。
对于活性中心为金属离子依赖的蛋白,或在IMAC的应用中,可选择EDTA-free的cOmplete ULTRA片剂。其余情况下,含EDTA的cOmplete ULTRA Tablets能抑制金属蛋白酶,带给蛋白周全保护。
产品使用——Easy to handle!
简单地将片剂加入细胞裂解液,片剂即溶。无需仔细称量粉末,无需接触有毒试剂,保护蛋白就是这样简单!
片剂的两种应用方式:片剂可直接加到抽提培养基,或者可先制备储液(2×浓度,用双蒸水溶解)。制成储液后,可在2-8℃稳定保存4周。
性能表现——瞬间的强效抑制
cOmplete ULTRA Tablets在细胞裂解液及蛋白酶溶液中均能高效抑制蛋白酶。
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图 1: CHO K1裂解液中 cOmplete ULTRA Tablets (含EDTA)对蛋白酶的抑制性能。(数据来源:Roche R&D) |
图 2: cOmplete ULTRA Tablets (含EDTA)对蛋白酶K的抑制性能。(数据来源:Roche R&D) |
**本试剂仅供生命科学研究使用,不可应用于体外诊断领域。
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* 如需对蛋白质的磷酸化状态进行保护,使用方便可靠的磷酸酶抑制剂混合片剂, 与cOmplete ULTRA, Mini片剂完全兼容,仅需在10 ml 缓冲液中投入两种片剂,即可防止磷酸酶和蛋白酶对您珍贵目标蛋白的破坏。
* 细菌,酵母等多种表达系统的裂解液中富含金属蛋白酶。请使用与含EDTA的cOmplete ULTRA片剂兼容的新型HIS-Tag蛋白纯化柱!
小贴士:在IMAC纯化中防止金属蛋白酶的蛋白水解作用
常用的细菌表达系统中金属蛋白酶是普遍存在的,然而,在某些实验中EDTA作为金属螯合剂必须被避免使用,如此便无法对金属蛋白酶的实现抑制。
传统的IMAC对多组氨酸标签蛋白的纯化中,不能使用EDTA来防止金属蛋白酶的水解作用。但罗氏最近推出的可耐受10mM的EDTA浓度,结合含EDTA的cOmplete ULTRA片剂一起使用,更周全地完成您的蛋白研究吧。
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