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- 2025年07月13日
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- 保质期：
6个月
- 英文名：
Super ECL Plus Deteckit
- 库存：
大量
- 供应商：
上海信裕
Western Blot ECL超敏发光液产品标准：荧光ECL检测试剂(A液25ml、B液25ml)
产品应用：免疫印记试验
产品介绍：
SuperECL Plus Western Blot超敏发光液
Western Blot超敏荧光发光试剂用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶HRP的抗体及其关联的抗原。由于采用了独特的发光底物系统，SuperECL Plus Western Blot超敏发光液是目前最灵敏的商业化荧光ECL检测试剂。(A液25ml、B液25ml)
极高灵敏度和高信噪比，检测10-100 fg抗原；
可在日光灯下进行发光操作；
节省抗体(1:2000-1:10000)
使用方法
1.执行常规SDS－PAGE、转膜和Western Blot步骤。注意第二抗体用HRP标记的lgG, 或者用一抗抗体-链亲和素-生物素-HRP夹心方法。
2.Western Blot最后一次洗膜的同时新鲜配制发光工作液：分别取等体积的溶液A和B，放入干净容器中混合。工作液室温放置数小时灵敏度略有降低但仍可使用。
3.用镊子取出Western Blot膜，沥干洗膜缓冲液。将膜完全浸入发光工作液(0.125ml发光工作液/cm2膜)中，与发光工作液充分接触。室温孵育3分钟。延长孵育时间并无必要，过长的孵育时间甚至会降低灵敏度。
4.用镊子夹起膜，沥干发光工作液。
5.打开X光胶片暗盒，在暗盒内表面铺一张面积大于膜的保鲜膜。将Western Blot膜贴在保鲜膜上，将保鲜膜折起来完全包裹Western Blot膜，去除皱褶。用滤纸吸去多余的发光工作液。用胶带将Western Blot膜固定在暗盒内，蛋白带面向上。
6.暗房内压X光胶片，分别曝光不同的时间如数秒到数分钟。显影冲洗。
储存条件：4 oC密封避光保存一年以上。
安全性： 无特殊毒性，按普通化学品处理。
Western Blot ECL超敏发光液 注意事项：
1.允许步骤2-5在日光灯下进行方便操作；但在强光下操作时间拖得太长，灵敏度可能会有一定程度降低，移到暗房操作可避免之。
2.戴手套可以避免在膜上留下手印。
3.长时间曝光或蛋白过量，将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系。
4.与工作液孵育1-5分钟后膜上的条带发光。强条带发光在暗房中肉眼可见，低丰度蛋白条带可能发光较弱，但仍可成功进行X光胶片曝光。不能简单以肉眼观察判断条带发光时间。荧光可持续10小时以上，条带弱时可延长曝光至1-10个小时。
5.由于超敏发光液及其灵敏，对大多数来源的进口抗体我们强烈推荐抗体的起始浓度为一抗1:1000，二抗1:2000。通常为一抗1:2000二抗1:4000或更加稀释。 抗体浓度过高将造成高背景或没有条带，导致失败!
6.某些保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光，应选择高质量保鲜膜。
7.使用预染色蛋白Marker和荧光-放射自显影曝光标 签可精确确定条带位置和大小。
试验问题解答:
使用时连对照都无法显示
问题解答：
实验时注意以下问题：① 夏天天气炎热，显-定影系统必须现用现配，用完后及时更换。② 发光液在炎热的天气不要在室温搁置太久。 ③ 试剂中的A、 B液必须用时才混合，不要放置一段时间才用。④ 膜洗完后应沥干全部水分后再进行显-定影，不要带很多水
xyA953Hu 【中文名称】：人信号调节蛋白α(SIRPα)ELISA试剂盒 【英文名称】：ELISA Kit for Signal Regulatory Protein Alpha (SIRPa) 【灵敏度】：9.375pg/mL
xyA947Hu 【中文名称】：人信号调节蛋白γ(SIRPγ)ELISA试剂盒 【英文名称】：ELISA Kit for Signal Regulatory Protein Gamma (SIRPg) 【灵敏度】：9.375pg/mL
xyA561Hu 【中文名称】：人白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒 【英文名称】：ELISA Kit for Leukemia Inhibitory Factor ReHZptor (LIFR) 【灵敏度】：9.375pg/mL
xyG790Hu 【中文名称】：人Mdm2 p53结合蛋白同源物(MDM2)ELISA试剂盒 【英文名称】：ELISA Kit for Mdm2 p53 Binding Protein Homolog (MDM2) 【灵敏度】：9.375pg/mL
xyK111Hu 【中文名称】：人DNA修复蛋白RAD50(RAD50)ELISA试剂盒 【英文名称】：ELISA Kit for DNA Repair Protein RAD50 (RAD50) 【灵敏度】：9.375pg/mL
xyB405Hu 【中文名称】：人补体成分1q受体(C1qR1)ELISA试剂盒 【英文名称】：ELISA Kit for Complement Component 1, Q ReHZptor (C1qR1) 【灵敏度】：9.375pg/mL
xyG480Hu 【中文名称】：人毛透明蛋白(TCHH)ELISA试剂盒 【英文名称】：ELISA Kit for Trichohyalin (TCHH) 【灵敏度】：9.375pg/mL
xyK505Hu 【中文名称】：人抗肝素/血小板因子4抗体(Anti-HPF4)ELISA试剂盒 【英文名称】：ELISA Kit for Anti-Heparin/Platelet Factor 4 Antibodies (Anti-HPF4) 【灵敏度】：9.375pg/mL
xyB324Hu 【中文名称】：人钙调结合蛋白(CALD)ELISA试剂盒 【英文名称】：ELISA Kit for Caldesmon (CALD) 【灵敏度】：9.375pg/mL
xyC223Hu 【中文名称】：人辅肌动蛋白α4(ACTN4)ELISA试剂盒 【英文名称】：ELISA Kit for Actinin Alpha 4 (ACTN4) 【灵敏度】：9.375pg/mL
xyG084Hu 【中文名称】：人嘌呤能受体P2Y14(P2RY14)ELISA试剂盒 【英文名称】：ELISA Kit for Purinergic ReHZptor P2Y, G Protein Coupled 14 (P2RY14) 【灵敏度】：9.375pg/mL
xyG120Hu 【中文名称】：人Synerginγ蛋白(SYNRγ)ELISA试剂盒 【英文名称】：ELISA Kit for Synergin Gamma (SYNRg) 【灵敏度】：9.375pg/mL
xyG711Hu 【中文名称】：人G蛋白偶联受体109B(GPR109B)ELISA试剂盒 【英文名称】：ELISA Kit for G Protein Coupled ReHZptor 109B (GPR109B) 【灵敏度】：9.375pg/mL
Western Blot ECL超敏发光液
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文献和实验一般使用辣根过氧化物酶 HRP-ECL 发光法或碱性磷酸酶 AP-NBT/BICP 显色法。 1．HRP-ECL 发光法： 将 A、B 发光液按比例稀释混合。膜用去离子水稍加漂洗，滤纸贴角吸干，反贴法覆于 A、B 混合液滴上，熄灯至可见淡绿色荧光条带（5 min 左右）后滤纸贴角吸干，置于保鲜膜内固定于片盒中，迅速盖上胶片，关闭胶盒，根据所见荧光强度曝光。取出胶片立即完全浸入显影液中 1～2 min，清水漂洗一下后放在定影液中至底片完全定影，清水冲净晾干，标定
Western blot 实验技巧精要 ——轻松获得高质量 western blot 条带图 Western blot 方法在 SCI 文章中出现的频率非常高，漂亮的 WB 电泳图可以给文章增色不少。但是 WB 实验的步骤琐碎，细节颇多，要想得到令人满意的结果还是需要花费很多时间和精力去摸索实验技巧的。 小编经过了一段时间的努力，已经可以比较轻松的实现用 WB 方法对磷酸化蛋白计算药物的 IC50 值（见下图）。 接下来，小编将结合自己的经验以及网上可以搜索
llh刘丽华 请教高手我最近做western blot，结果总是不理想，目的条带总是很淡，上样量已经是60ug了，封闭用的是5%脱脂奶粉，我还应该怎么改进哦？下面是我的结果，采用的是ECL化学发光，凝胶成像系统拍照，下面一条是我的目的条带。 麻烦各位帮帮忙吧！ Mostino 转膜应充分，并提高第一抗体的使用量！ 成其瑞 用好点的抗体 volano
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