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X-α-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖

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  • ¥399 - 1979
  • 翌圣生物(Yeasen)已认证
  • 上海
  • 10903ES
  • 2025年10月24日
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      有效期1年

    • 英文名

      X-α-Gal

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    • 供应商

      翌圣生物科技(上海)股份有限公司

    • CAS号

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    • 保存条件

      -20°C避光避潮

    • 规格

      25mg(10903ES25)/100mg(10903ES60)/250mg(10903ES72)/500mg(10903ES76)

    规格:25mg(10903ES25)产品价格:¥399.00
    规格:100mg(10903ES60)产品价格:¥769.00
    规格:250mg(10903ES72)产品价格:¥1259.00
    规格:500mg(10903ES76)产品价格:¥1979.00

    X-α-Gal是一种酵母半乳糖苷酶 (MEL1) 的显色底物,用于在培养基上直接检测GAL4系统的酵母双杂交作用。通过蓝白颜色筛选,快速和简便地识别阳性的蓝色克隆,无需费时的β-半乳糖苷酶报告基因检测。

    X-α-Gal检测酵母MEL1基因的激活。MEL1是GAL4酵母双杂交系统的一个报告基因,编码分泌型的α-半乳糖苷酶。该酶可水解无色的X-α-Gal底物并最终产生蓝色产物。表达α-半乳糖苷酶的酵母菌落在含有X-α-Gal的培养基上显蓝色,即阳性的双杂交作用。

     产品细节图片1


    产品用途

    1)α-半乳糖苷酶的显色底物,形成蓝色沉淀。在培养基上直接检测酵母双杂交相互作用,利用此底物可以省去双杂交体系中的β-半乳糖苷酶溶液和filter-lift assays;

    2)用于区分肠杆菌科内的不同菌种以及区分双歧杆菌和乳酸菌;

    3)在组织化学中用于酶活性的检测。


    运输与保存方法

    冰袋运输。-20℃保存,有效期1年。


    使用方法

    一、涂布于预制平板:

    1)溶解24 mg X-α-gal于6 mL DMF,终浓度为4 mg/ mL。

    2)涂布200 μL(15 cm) 或者100 μL(10 cm)X-α-gal 储存液于预制平板上;

    3)置于37℃培养箱至液体被吸收(由于DMF挥发性低,最长可放4小时);
    4) 将转化细菌或酵母涂于平板上,于37℃或30℃培养直至蓝色菌落出现。

    二、直接加入琼脂中

    1)溶解60 mg X-α-gal于3 mL DMF,终浓度为20 mg/ mL。

    2)将已灭菌琼脂培养基冷却至50-55℃;

    3)向上述培养基中加入20 mg/ mL X-α-Gal,比例为每升培养基中加入1 mL X-α-Gal溶液。


    注意事项

    1)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
    2)本产品仅作科研用途!

     

    HB210802

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    • 作者
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    • 询问日期
    图标文献和实验
    该产品被引用文献
    [1] Shi K, Yang L, Zhuang X, Zhang L, Qi H. Yeast Two-Hybrid Screen Identifies PKA-Riα Interacting Proteins during Mouse Spermiogenesis. Genes (Basel). 2021;12(12):1941. Published 2021 Nov 30. doi:10.3390/genes12121941(IF:4.096)
    [2] Zhang G, Li G, Xiang Y, Zhang A. The transcription factor ZmMYB-CC10 improves drought tolerance by activating ZmAPX4 expression in maize. Biochem Biophys Res Commun. 2022;604:1-7. doi:10.1016/j.bbrc.2022.02.051(IF:3.575)
    相关实验
    • 蓝白斑筛选假阴性

      能的β-半乳糖苷酶,该酶能把培养基中无色的X-gal5-溴-4--3-吲哚-β-D-半乳糖苷)底物分解成半乳糖和深蓝色的5-溴-4--靛蓝。然而当外源DNA 插入质粒位于α-肽编码序列中的多克隆位点时,由于破坏了α-肽的阅读框架,因而不能表达出与宿主菌基因组表达的缺陷型β-半乳糖苷酶多肽发生α-互补。由于没有β-半乳糖苷酶的酶解作用,致使重组菌形成白色菌落。由此,可以借助蓝白斑很容易筛选出重组子.不过实际操作中发现当插入小片段时,重组子也有形成浅蓝斑的情况.即蓝色菌斑也有可能含外源基因。据最新报道,大概

    • 重组质粒的筛选

      基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点。当这种载体进入可编码β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主细胞后(质粒和宿主细胞编码的片段各自都没有酶活性),它们可以融为一体,形成具有酶学活性的蛋白质,这种现象叫α互补。由α互补而产生的 Lac 细菌在呈色底物 5-溴-4--3-吲哚-β-半乳糖苷(X-gal)和诱导剂异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)存在下形成蓝色菌落。当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,导致产生无α互补能力的氨基端片段。因此,带有重组质粒的细菌形成白色菌落。通过呈色反应即可

    • 常用发色底物

      -4--3-吲哚-b-d-吡喃半乳糖苷 萘酚AS-BI--b-d-吡喃半乳糖苷 BCIG NABG 无色 无色 蓝色 红色 不溶 不溶  

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