人血管生成素4(ANG-4)ELISA 检测试剂盒

人血管生成素4(ANG-4)ELISA 检测试剂盒

本试剂仅供研究使用

试验原理：

ANG-4试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知ANG-4浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将ANG-4和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中ANG-4的活性浓度呈比例关系。

人血管生成素4(ANG-4)ELISA 检测试剂盒试剂盒内容及其配制

自备材料

1． 蒸馏水。

2． 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

3． 振荡器及磁力搅拌器等。

安全性

1． 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2． 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

人血管生成素4(ANG-4)ELISA 检测试剂盒操作注意事项

1． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5． 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8． 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

样品收集、处理及保存方法

1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、 保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

人血管生成素4(ANG-4)ELISA 检测试剂盒试剂的准备

1． 标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：

2． 洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。

操作步骤

1． 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2． 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

3． 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5． 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

8． 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9． 在450nm波长处测定各孔的OD值。

性能

1. 灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2. 特异性：不与人其它细胞因子反应。

3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

4.局限性：6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。

结果 判 断 与 分 析

1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的ANG-4标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的ANG-4含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

3、检测值范围：0-400ng/ml

4、敏感度： 1.0ng/ml
XY-EL-R0382c 大鼠粘着斑激酶(FAK)ELISA试剂盒说明书 Rat FAK (Focal Adhesion Kinase) ELISA Kit
XY-EL-R0384c 大鼠卵泡抑素(FST)ELISA试剂盒说明书 Rat FST (Follistatin) ELISA Kit
XY-EL-R0385c 大鼠趋化因子C-X3-C-基元配体1(CX3CL1)ELISA试剂盒说明书 Rat CX3CL1 (Chemokine C-X3-C-Motif Ligand 1) ELISA Kit
XY-EL-R0386c 大鼠绒毛膜促性腺激素β肽(CGβ)ELISA试剂盒说明书 Rat CGβ (Chorionic Gonadotropin Beta Polypeptide) ELISA Kit
XY-EL-R0387c 大鼠脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)ELISA试剂盒说明书 Rat ATGL (Adipose Triglyceride Lipase) ELISA Kit
XY-EL-R0389c 大鼠游离睾酮(F-TESTO)ELISA试剂盒说明书 Rat F-TESTO (Free Testoterone) ELISA Kit
XY-EL-R0390c 大鼠游离甲状腺素(fT4)ELISA试剂盒说明书 Rat fT4 (Free Thyroxine) ELISA Kit
XY-EL-R0391c 大鼠促卵泡激素(FSH)ELISA试剂盒说明书 Rat FSH (Follicle Stimulating Hormone) ELISA Kit
XY-EL-R0392c 大鼠αL岩藻糖苷酶(FUCA)ELISA试剂盒说明书 Rat FUCA (Alpha-L-Fucosidase, Tissue) ELISA Kit
XY-EL-R0393c 大鼠G蛋白β1(GNb1)ELISA试剂盒说明书 Rat GNb1 (G Protein Beta 1) ELISA Kit
XY-EL-R0394c 大鼠β-半乳糖苷酶(GLβ)ELISA试剂盒说明书 Rat GLβ (Galactosidase, Beta) ELISA Kit
XY-EL-R0395c 大鼠脂肪酸合酶(FASN)ELISA试剂盒说明书 Rat FASN (Fatty Acid Synthase) ELISA Kit
XY-EL-R0396c 大鼠甘丙肽/甘丙素(GAL)ELISA试剂盒说明书 Rat GAL (Galanin) ELISA Kit
XY-EL-R0397c 大鼠半乳凝素1(GAL1)ELISA试剂盒说明书 Rat GAL1 (Galectin 1) ELISA Kit
XY-EL-R0398c 大鼠半乳凝素2(GAL2)ELISA试剂盒说明书 Rat GAL2 (Galectin 2) ELISA Kit
XY-EL-R0399c 大鼠半乳凝素3(GAL3)ELISA试剂盒说明书 Rat GAL3 (Galectin 3) ELISA Kit
XY-EL-R0400c 大鼠半乳凝素4(GAL4)ELISA试剂盒说明书 Rat GAL4 (Galectin 4) ELISA Kit
XY-EL-R0401c 大鼠半乳凝素7(GAL7)ELISA试剂盒说明书 Rat GAL7 (Galectin 7) ELISA Kit
XY-EL-R0402c 大鼠半乳凝素8(GAL8)ELISA试剂盒说明书 Rat GAL8 (Galectin 8) ELISA Kit
XY-EL-R0403c 大鼠半乳凝素9(GAL9)ELISA试剂盒说明书 Rat GAL9 (Galectin 9) ELISA Kit
XY-EL-R0404c 大鼠γ-谷氨酰转肽酶1(γGT1)ELISA试剂盒说明书 Rat γGT1 (Gamma Glutamyltransferase 1) ELISA Kit
XY-EL-R0406c 大鼠缝隙连接蛋白β1(GJb1)ELISA试剂盒说明书 Rat GJb1(Gap Junction Protein Beta 1) ELISA Kit
XY-EL-R0407c 大鼠胃泌素抑制肽(GIP)ELISA试剂盒说明书 Rat GIP (Gastric Inhibitory Polypeptide) ELISA Kit
XY-EL-R0408c 大鼠胃泌素34(GT-34)ELISA试剂盒说明书 Rat GT-34 (Gastrin 34) ELISA Kit
XY-EL-R0409c 大鼠胃肠癌标志物CA199(CA199)ELISA试剂盒说明书 Rat CA199 (Gastrointestinalcancer Marker-CA199) ELISA Kit
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XY-EL-R0411c 大鼠GATA结合蛋白1(GATA1)ELISA试剂盒说明书 Rat GATA1 (GATA Binding Protein 1) ELISA Kit
XY-EL-R0412c 大鼠GATA结合蛋白2(GATA2)ELISA试剂盒说明书 Rat GATA2 (GATA Binding Protein 2) ELISA Kit
XY-EL-R0413c 大鼠GATA结合蛋白3(GATA3)ELISA试剂盒说明书 Rat GATA3 (GATA Binding Protein 3) ELISA Kit
XY-EL-R0414c 大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)ELISA试剂盒说明书 Rat GATA4 (GATA Binding Protein 4) ELISA Kit
XY-EL-R0415c 大鼠GATA结合蛋白5(GATA5)ELISA试剂盒说明书 Rat GATA5 (GATA Binding Protein 5) ELISA Kit
XY-EL-R0416c 大鼠凝溶胶蛋白(GS)ELISA试剂盒说明书 Rat GS (Gelsolin) ELISA Kit
XY-EL-R0417c 大鼠普通转录因子IIB(GTF IIB)ELISA试剂盒说明书 Rat GTFⅡB (General Transcription Factor IIB) ELISA Kit
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XY-EL-R0419c 大鼠神经胶质成熟因子β(GMFB)ELISA试剂盒说明书 Rat GMFB (Glia Maturation Factor, Beta) ELISA Kit
XY-EL-R0420c 大鼠胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)ELISA试剂盒说明书 Rat GDNF (Glial Cell Line Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit
XY-EL-R0421c 大鼠糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)ELISA试剂盒说明书 Rat GITR (Glucocorticoid Induced Tumor Necrosis Factor Receptor) ELISA Kit
XY-EL-R0422c 大鼠糖皮质类固醇受体(GR)ELISA试剂盒说明书 Rat GR (Glucocorticoid Receptor) ELISA Kit