MC3T3-E1 Subclone 14细胞系、MC3T3-

MC3T3-E1 Subclone 14细胞系、MC3T3-E1 Subclone 14细胞株、MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14)

细胞名称：MC3T3-E1 Subclone 14 小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14

组织来源：颅顶骨

培养条件：MEMα +10% FBS

形　　态：贴壁；成纤维细胞样

背　　景：从克隆的但是表型各异的MC3T3-E1细胞系中分离出一系列亚克隆。从含抗坏血酸培养基生长的成骨细胞中选择高或低成骨细胞分化、矿化的亚克隆。MC3T3亚克隆4（ATCC CRL-2593）和MC3T3亚克隆14（ATCC CRL-2594）在抗坏血酸和3到4mM无机磷酸盐中生长表现出高水平的成骨细胞分化。它们10天后形成一个矿化良好的细胞外基质（ECM）。MC3T3亚克隆24（ATCC CRL-2594）和MC3T3亚克隆30（ATCC CRL-2596）在抗坏血酸中生长表现出很差的成骨细胞分化。不形成ECM， 可以作为亚克隆4和14的阴性对照。矿化的亚克隆选择的表达作为成骨细胞标记的mRNA，及唾液酸糖蛋白（BSP），骨钙素（OCN），和甲状旁腺激素/甲状旁腺激素相关蛋白受体的mRNA。高或者低的分化潜能的亚克隆在培养中生产出相似数量的胶原质，表达可比较的基本水平的mRNA编码Osf2/Cbfa1，一种成骨细胞相关转录因子。植入免疫缺陷小鼠以后，高分化性的亚克隆形成与骨类似的形成小骨的编织骨，低分化细胞只是产生纤维组织。这些细胞系是研究体外成骨细胞分化的好模型，尤其是ECM信号。它们和原代培养颅顶成骨细胞的行为类似。

General Information:
Organism: Mus musculus, mouse
Tissue: bone, calvaria
Culture Properties: adherent
Morphology: fibroblast

Culture Method:
Complete Growth Medium: MEMα (Gibco 12571-063) +10% FBS+ Penicillin/Streptomycin
Subculturing:
Volumes are given for a 25cm2
flask. Increase or decrease the
amount of dissociation medium needed proportionally for culture
vessels of other sizes.
1. Remove and discard culture medium.
2. Briefly rinse the cell layer with 0.25%(w/v) Trypsin-EDTA
solution to remove all traces of serum that contains trypsin
inhibitor.
3. Add 1.0 to 2.0mL of Trypsin-EDTA solution to flask and
observe cells under an inverted microscope until cell layer is
dispersed.
4. Add 6.0 to 8.0mL of complete growth medium and aspirate
cells by gently pipetting.
5. Add appropriate aliquots of the cell suspension to new culture
vessels.
6. Incubate cultures at 37°C, 5% CO2.
Subcultivation Ratio: A subcultivation ratio of 1:2 to 1:6 is recommended
Cryopreservation:
Freeze medium: Complete growth medium supplemented with
10% (v/v) DMSO
Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

购买细胞注意事项：
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和Mycell技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。