神经降压素放免药盒操作说明书
NT(HY-10169) RIA KIT
神经降压素(Neurotensin NT)是一种首先由牛的下丘脑中提取的13个氨基酸组成的生物活性多肽,分子量1673。其后发现NT也存在人和其它哺乳动物的胃肠道中,因而是一种脑肠肽。它除了具有强烈舒血管,降血压作用外,还有显著镇痛作用等。现有研究表明,血浆和脑脊液中NT的浓度与心血管疾病、消化道疾病、神经系统疾病的发生和发展有密切联系。并有报道,某些肝癌、胰腺癌、小肠癌患者血中NT水平升高。因此,本药盒的建立,为基础医学与临床研究NT对人体的生理和病理作用机制提供了可靠手段。
神经降压素放免药盒测定盒的组成:
1、 缓冲液一瓶。
2、 PR分离剂(第二抗体 )一瓶。
3、 NT 抗体一瓶。
4、 NT标记一瓶 。
5、NT标准品五瓶:20、60、180、540、1620pg/ml。
6、抑肽酶一瓶。
7、10%EDTA.Na2一瓶。
样品收集:
1、 取空腹静脉血4ml注入含10%EDTA.Na2 40ul和抑肽酶10ul(含100U/ml以上)的试管中,混匀4℃,3000rpm/ min离心10min,分离血浆(溶血样品影响测定结果)。如需要可分装2-3份保存,放-20℃可保存。测定前,使样本置于室温或冷水中复融,再次4℃,3000rpm/ min离心5min,取上清测定。
2、 组织样品的处理:取出活组织,吸去血迹,称重,尽快放入0.5mol/L醋酸 1ml略做碾磨,然后在100℃水浴中煮沸10分钟,匀浆。4℃,3000rpm/ min离心15min,取上清放-20℃以下保存,测定时用PBS稀释,以调节至PH7.4。另外,每种组织的样品非特异结合(U0)可能有差异,每份标本最单独做一个U0。取组织的重量一般在100mg左右为好。
3、 血浆样品处理:血浆0.5ml,加无水乙醇1ml,混匀,4℃ 3000rpm/ min离心10min,将上清全部移入青霉素小瓶内,放在45℃水浴锅上蒸干 大约24小时样品可以完全干燥,干燥后将青霉素瓶加盖封口,放-20℃保存。测定前每瓶加PBS0.5ml溶解,取出200ul检测。
4、 脑脊液样品:每ml脑脊液加抑肽酶500KIU,-20℃保存。
神经降压素放免药盒 注意事项:
1、本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀本
月分离剂使用前充分混匀(不可冰冻)。
2、测兔标本时,应改用25%PEG 500ul/管 分离。同时向 NSB、S0、 S1~S5 管
加Υ球蛋白液100ul/管;U、U0管加缓冲液100ul/管。
测定方法:本实验采用非平衡法,取聚苯乙烯编号,按下表操作。
NT RIA 操作程序(单位:ul)
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 300 200 —— ——
标 准 品 —— —— —— 200 ——
样 品 —— —— —— —— 200
抗 体 —— —— 100 100 100
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摇匀,4℃ 24小时
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125I-NT 100 100 100 100 100
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摇匀,4℃ 24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀,室温放置20分钟,3500转/分 离心25 分钟,去上清,测定各管沉淀cpm值。
神经降压素放免药盒 结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,在半
对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
本试剂盒主要技术参数:
NSB:<5%
灵敏度:10pg/ml。
可测范围:20~1620 pg/ml。
精密度:批内CVW<10%,批间CVb<15% 。
特异性:本抗体与ET
、CGRP、NPY、MTL、BGP、CCK等均无交叉反应。
正常参考值:血浆提取测定:66.19±28.68 pg/ml;
血浆直接测定:74.30±30.55 pg/ml。
本月药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
—————————————————————————————————————————xy-E11790 小鼠巨噬细胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)ELISA试剂盒 Murine macrophage inflammatory protein- 1δ (MIP-1δ/CCL15) ELISA kit
xy-E11791 小鼠肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)ELISA试剂盒 Mouse lungs activation regulated chemokine (PARC/CCL18) ELISA kit
xy-E11792 小鼠溶菌酶(LZM)ELISA试剂盒 Mouse lysozyme (LZM) ELISA Kit
xy-E11793 小鼠可溶性CD30(sCD30)ELISA试剂盒 Mouse soluble CD30 (sCD30) ELISA kit
xy-E11794 小鼠可溶性肌球蛋白重链2(sMHC-2)ELISA试剂盒 Mouse soluble myosin heavy chain 2 (sMHC-2) ELISA Kit
xy-E11795 小鼠可溶性肌球蛋白重链1(sMHC-1)ELISA试剂盒 Mouse soluble myosin heavy chain 1 (sMHC-1) ELISA Kit
xy-E11796 小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC) ELISA试剂盒 Mouse mucin / mucin 5AC (MUC5AC) ELISA Kit
xy-E11797 小鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒 Mouse angiotensin-converting enzyme (ACE) ELISA kit
xy-E11798 小鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒 Mice angiotensin Ⅱ (ANG-Ⅱ) ELISA kit
xy-E11799 小鼠角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA试剂盒 Mouse keratinocytes endocrine factor (KAF) / amphiregulin (AR) ELISA kit
xy-E11800 小鼠活化素A(ACV-A)ELISA试剂盒 Mice Activin A (ACV-A) ELISA Kit
xy-E11801 小鼠天门冬酰胺酶ELISA试剂盒 Asparaginase mouse ELISA kit
xy-E11802 小鼠抗增殖细胞抗原抗体(PCNA)ELISA试剂盒 Mouse anti proliferating cell antigen antibody (PCNA) ELISA Kit
xy-E11803 小鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)ELISA试剂盒 Mouse anti- thyroid peroxidase antibodies (TPO-Ab) ELISA Kit
xy-E11804 小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒 Mouse brain -derived neurotrophic factor (BDNF) ELISA kit
xy-E11805 小鼠凋亡诱导因子(AIF)ELISA试剂盒 Mouse apoptosis-inducing factor (AIF) ELISA kit
xy-E11806 小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA试剂盒 Mouse bone morphogenetic protein 2 (BMP-2) ELISA Kit
xy-E11807 小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA试剂盒 Mouse bone morphogenetic protein 4 (BMP-4) ELISA Kit
xy-E11808 小鼠骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)ELISA试剂盒 Mouse bone morphogenetic protein receptor 1A (BMPR-1A) ELISA Kit
xy-E11809 小鼠碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒 Mouse alkaline phosphatase (ALP) ELISA kit
xy-E11810 小鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA试剂盒 Mouse angiopoietin- 4 (ANG-4) ELISA Kit
xy-E11811 小鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA试剂盒 Mouse bone forming protein receptor Ⅱ (BMPR-Ⅱ) ELISA kit
xy-E11812 小鼠主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)ELISA试剂盒 The main organization of mouse MHC class Ⅲ (MHC-Ⅲ / H-2 Ⅲ) ELISA kit