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标本的采取和保存
可用作甲状腺球蛋白检测试剂盒测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行
测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检
测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清。制
备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清自然凝固、血块收缩后即可取得。除
特殊情况外,在医学检验中均以血清作为检测标本。在甲状腺球蛋白检测试剂盒中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的甲状腺球蛋白检测试剂盒测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久,其中的可发生聚合,在间接法甲状腺球蛋白检测试剂盒中可使本底加深。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存。甲状腺球蛋白检测试剂盒冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。
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xyN826Hu 人丝氨酸/苏氨酸激酶39(STK39)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Serine/Threonine Kinase 39 (STK39)
xyJ161Hu 人弹性蛋白微原纤维界面因子2(EMILIN2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Elastin Microfibril InterfaHZ Located Protein 2 (EMILIN2)
xyG609Hu 人类固醇硫酸酯酶同工酶S(STS)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Steroid Sulfatase Isozyme S (STS)
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文献和实验一、反应曲线 首先,我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图,可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,如下图所示: 二、反应原理 对于延迟区来讲,无规律可寻,对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法,是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时,连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点,并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等,此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
脊椎动物甲状腺中大量存在的特异的含碘蛋白质。作为甲状腺激素的甲状腺素3, 5, 3′ -三碘甲腺原氨酸,是甲状腺内这种蛋白的酪氨酸残基经碘化所生成的碘化酪氨酸的两个残基,进一步缩合而生成的。这类激素需经蛋白酶作用于甲状腺球蛋白,使其变成游离态释放于血液中。由此可见,甲状腺球蛋白是甲状腺激素生成的场所,另也起着贮存型分子的作用。分子量约为 67万,等电点为 pH4.5左右。由于种属的不同,具有含碘量不相同的各种分子,其含量为 0.2-1%。除上述两种甲状腺激素含碘氨基酸残基外,还有二碘
Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失,细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核,搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A.悬浮细胞: 按照实验方案进行凋亡诱导,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
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