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- 2025年07月12日
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标本的采取和保存
可用作E选择素测定的标本十分广泛，体液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、粪便）等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行
测定（如血清、尿液），有些则需经预处理（如粪便和某些分泌物）。大部分ELISA检
测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外，其他成份均同等于血清。制
备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只要待血清自然凝固、血块收缩后即可取得。除
特殊情况外，在医学检验中均以血清作为检测标本。在E选择素中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP为标记的E选择素测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久，其中的可发生聚合，在间接法E选择素中可使本底加深。一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超过一周测定的需低温冰存。E选择素冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠倒混和，不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作，也可加入适当防腐剂。
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文献和实验多采用双抗体夹心ELISA，研究最多的选择素家和免疫球蛋白超家族。前者有E、L、P三型，均可见血液中。溶血性尿毒症和血小板减少性紫癜患者血液中，P选择素比正常人高2～3倍，而败血症、HIV感染和艾滋病患者血液中L选择素明显增高。血液中存在可溶性E选择素是内皮细胞激活的证据，败血症、糖尿病等患者血液中E选择素水平增高，一般与疾病的活动性无关，而与器官受损程度相关。如败血症患者，可溶性E选择素可增高20倍以上，据称与疾病的严重性或预后有关。肝炎、肝硬化等患者血液中超免疫球蛋白家族中ICAM
性E选择素是内皮细胞激活的证据，败血症、糖尿病等患者血液中E选择素水平增高，一般与疾病的活动性无关，而与器官受损程度相关。如败血症患者，可溶性E选择素可增高20倍以上，据称与疾病的严重性或预后有关。肝炎、肝硬化等患者血液中超 免疫球蛋白 家族中ICAM-1水平增高，与肝功能损害指标相关。总之，现已发现许多疾病可见细胞粘附分子数量的异常，但这类工作尚处于探索阶段，有待深入研究和资料的积累才能判断其确切的临床意义。
(四)选择素介导的Th1细胞浸润［11］ P选择素和 E选择素是粘附分子选择素家族成员，介导细胞与细胞之间的粘附。Th1细胞低表达高亲和 E选择素配体和高表达 P选择素配体，但是Th2细胞均不表达这两种配体。在以Th1反应为主的动物实验模型中，Th1细胞选择性浸润炎症组织。在2,4-dinitrofluorobenzene(DNFB)诱导的 DTH反应中，用不同标记物分别标记Th1和Th2细胞，然后给动物注射Th1和 Th2细胞，结果在炎症部位Th1细胞浸润数量超过Th2细胞的5倍。在抗原诱导
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