REPLI-g UltraFast Mini Kit (25) 150033 用于从珍贵或少量样本中超快速,高度均一地进行全基因组扩增
快速全基因组扩增,仅需1–1.5小时
获得无限量DNA适合多种下游应用
从各种起始样本中进行高重复性扩增
高度稳定的DNA适合长期储存
基因组DNA量不足以进行基因组分析,这一问题可通过样本内全基因组DNA扩增解决。REPLI-g UltraFast Kit包含REPLI-g UltraFast DNA Polymerase,该聚合酶可在60–90分钟内高度均一、正确的对少量样本进行全基因组扩增,通常20 μl反应体系产量可达7 μg。起始样本可 以是基因组DNA、新鲜或干血、口腔拭子、新鲜或冷冻组织和培养细胞等。扩增得到的DNA可即用于多种基因分析。
DNA扩增产量高。
使用REPLI-g UltraFast Mini Kit对基因组DNA样本(每个10 ng)和无模板对照(NTC)样本(不含模板DNA)进行扩增,不同时间后测定DNA产量。扩增60分钟后的平均产量是7 µg,扩增90分钟后平均产量是10–13 µg。45分钟后即可获得多至5 µg DNA,可快速用于下游基因分析。在无模板对照反应中未检测到DNA。
性能
孵育90分钟后,可从20 µl反应体系中获得7 µl DNA。如果时间有限,45分钟后也可获得足以用于下游应用的产物(参见Consistent and high yields of amplified DNA)。阴性对照样本(无模板DNA)不被扩增,能够可靠检测样本或污染DNA是否存在(参见Consistent and high yields of amplified DNA)。
使用REPLI-g UltraFast Mini Kit进行全基因组扩增需要3个基本步骤。首先,对样本(10 ng纯化的基因组DNA、0.5 µl全血或300个组织培养细胞)进行温和的碱变性,避 免模板DNA片段化。然后中和样本,加入REPLI-g UltraFast DNA Polymerase于30°C孵育。60分钟后可获得产物,扩增得到的DNA无需纯化,可即用于下游应用。