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上海古朵生物有限公司
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现货
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详见说明书
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100张/盒,5盒/箱
产品名称:PCR板板膜(荧光定量)
货号:GD-HC053S
数量:大量库存
规格:100张/盒,5盒/箱
保存条件:RT
用途:仅用于科研实验
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文献和实验和鉴别,特别是在高通量实验中。尽管塑料的颜色对 DNA 扩增没有影响,但在设置实时荧光定量 PCR 的反应时,与透明耗材相比,我们更推荐使用白色塑料耗材或者经磨砂处理的塑料耗材,以实现灵敏和准确的荧光检测。 qPCR 使用透明和白色耗材的结果比较(A)与透明孔相比,白色孔 Ct 值更低(灵敏度更高)。(B)白色孔在技术重复中也表现出更高的一致性。 白色耗材通过阻止荧光折射出管来提高 qPCR 数据的灵敏度和一致性。折射被最小化时,更多的信号被反射回检测器,从而增加信噪比。此外,白色管壁可阻止荧
,一个样本建议至少做 3 个技术型重复;5、模板为 cDNA 时,建议稀释 5 - 10 倍,减少反转录体系对 qPCR 实验的抑制作用,模板量最好进行梯度摸索,使 CT 值落在 20 - 30 之间最佳;6、确定所需的反应数量,在反应数量的基础上增加 5 - 10%,计算体积配置数量;7、体系配制采用能预混则预混原则,混匀后离心并保证无气泡;8、尽量选择进口且配套的耗材,如 ABI 仪器最好使用 ABI 封板膜,伯乐仪器使用配套的白色陶瓷板子。反应条件的设定:不同的荧光定量酶可能反应条件不一
第三代PCR技术--纪念Kary Mullis获得诺奖30周年
:1)采用毒性较大的核酸染料,会对实验人员和环境造成伤害,2)容易发生污染而造成假阳性结果,3)检测耗时长,操作繁琐,4)只能定性检测产物的有无,而不能对起始模板量进行定量。 第二代PCR就是荧光定量PCR技术(Real-Time PCR,qPCR),荧光定量PCR诞生于1992年,它通过在反应体系中加入能指示反应进程的荧光试剂来实时监测扩增产物的积累,借助荧光曲线的Cq值来定量起始靶基因的浓度。荧光定量PCR需要借助校准物制备的标准曲线来定量,因此实际上是一种相对定量方法。而且不同厂家生成的仪器
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